傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度，當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶?jī)?nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過(guò)度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

ZR-75-1人乳腺癌細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無(wú)菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無(wú)菌，且須在無(wú)菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長(zhǎng)。來(lái)源于不同動(dòng)物種類、組織類型的細(xì)胞，對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)起著關(guān)鍵作用。可根據(jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過(guò)短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過(guò)小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過(guò)大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴?，?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過(guò)程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

GGT2 heavy chain： γ谷酰轉(zhuǎn)肽酶2重鏈抗體 LILRB3 Others Human 人 LILRB3 / LIR3 / ILT5 / CD85a 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

CL-0116HSC-T6(大鼠肝星形細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 人血凝素(HA)ELISA 試劑盒 IgM/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的兔抗IgM 0.1ml

GGT5 heavy chain： γ-谷酰轉(zhuǎn)肽酶5重鏈抗體 Hela, 人細(xì)胞系 Human

HBdSMC Pellet 人膀胱平滑肌細(xì)胞團(tuán)塊 > 1 mio.cells 人腦膜細(xì)胞cDNAHMC cDNA 人血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA 試劑盒 IgM/Cy7 Cy7標(biāo)記的兔抗IgM 0.1ml

phospho-GATA3 (Ser115)： 0酸化GATA結(jié)合蛋白3抗體 人神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞;U251

MDC1： DNA損傷關(guān)卡蛋白1抗體 FLT4 Others Human 人 VEGFR3 / FLT4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

CM-R124大鼠脈絡(luò)膜血管細(xì)胞培養(yǎng)基100mL 大鼠神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA 試劑盒 PEDF  大鼠色素上皮衍生因子 96T

Nebulin： 伴肌動(dòng)蛋白抗體 正常大鼠腎細(xì)胞;NRK-52E

U14-GFP(小鼠子細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 SW 1088[SW-1088; SW1088](人腦星型膠質(zhì)瘤細(xì)胞) 大鼠神經(jīng)降壓肽()ELISA試劑盒 TSGF(Mouse Tumor Specific Growth Facter/tumor supplied group of factor)  小鼠特異生長(zhǎng)因子/相關(guān)因子 96T

NDRG4： 抑癌基因NDRG4抗體 VERO細(xì)胞衍生株;SVP

ZR-75-1人乳腺癌細(xì)胞ICOS ligand： 誘導(dǎo)協(xié)同刺激分子配體CD275抗體 PRMT6 Others Human 人 PRMT6 / HRMT1L6 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人心肌細(xì)胞-RNAHCM-a miRNA5 μg 人c-myc癌基因產(chǎn)物(c-myc)ELISA 試劑盒 Tubulin- Gamma 微管蛋白-γ抗原 0.5mg

IBDV： 雞傳染性法氏囊病病毒抗體 人纖維肉瘤細(xì)胞;HT-1080

SVEC4-10(小鼠淋巴結(jié)內(nèi)皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 CCL2 / MCP-1 / MCP1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 人Clara細(xì)胞分泌蛋白(CC-SP)ELISA試劑盒 TWIST protein peptide TWIST蛋白抗原 0.5mg

IL-17： 白介素-17抗體 腦膜細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)