型 號
產(chǎn)品時間2024-02-07
所屬分類人源細(xì)胞系
報價1500
傳代培養(yǎng)操作步驟：
一、貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：
（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長密度，當(dāng)細(xì)胞生長密度達(dá)到80%~90%時，即可進(jìn)行傳代。
（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。
（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。
（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。
（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。
（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。
人睪丸支持細(xì)胞永生化
細(xì)胞基本屬性：
產(chǎn)品名稱 | 人睪丸支持細(xì)胞永生化 | 組織來源 | 正常睪丸組織 |
種屬 | 人 | 生長特性 | 貼壁生長 |
細(xì)胞代數(shù) | 10代以內(nèi) | 細(xì)胞形態(tài) | 梭形不規(guī)則細(xì)胞 |
支原體檢測 | 無 | 凍存條件 | 無血清凍存液，液氮儲存 |
細(xì)胞詳細(xì)介紹：
細(xì)胞別稱 背景簡介 人睪丸支持細(xì)胞永生化通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶SV40基因。睪丸間質(zhì)細(xì)胞成群分布在曲精小管之間，胞體呈圓形，橢圓形或不規(guī)則形，胞體較大，直徑約20μm，胞質(zhì)呈嗜酸性，細(xì)胞核呈圓形或卵圓形，常位于中央，染色較淡，有1～2個核仁線粒體多，呈管嵴狀，無分泌顆粒。睪丸支持細(xì)胞是存在于雄性睪丸間質(zhì)中的主要細(xì)胞類型，其主要功能是分泌和合成睪丸酮，睪丸酮在刺激發(fā)生、成熟及性功能的維持等方面具有重要作用。目前，以睪丸支持細(xì)胞為靶向的藥物研究備受關(guān)注。體外培養(yǎng)的睪丸支持細(xì)胞能直接反應(yīng)藥物對該細(xì)胞作用的特點，使分離純化睪丸支持細(xì)胞成為必要的前提條件。 細(xì)胞鑒定 3β-HSD免疫熒光染色為陽性，細(xì)胞純度高于90%，不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌 細(xì)胞規(guī)格 1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝 培養(yǎng)基 原代成纖維細(xì)胞培養(yǎng)體系 培養(yǎng)條件 氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃ 凍存條件無血清凍存液，液氮儲 發(fā)貨方式復(fù)蘇發(fā)貨（免運輸費用）/ 凍存發(fā)貨（需加干冰運輸費用） 順豐快遞 供應(yīng)限制僅限于科學(xué)研究，絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用 特別說明以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主 |
二、懸浮細(xì)胞
傳代培養(yǎng)操作步驟如下：
一般實驗室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時，即可進(jìn)行傳代。
（1）嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。
（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細(xì)胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時可用預(yù)實驗的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。
（3）胎牛血清對于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長起著關(guān)鍵作用。可根據(jù)文獻(xiàn)或預(yù)實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實驗完成。
（4）消化細(xì)胞時應(yīng)避免消化時間過短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時間過長導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實驗進(jìn)度。
（5）細(xì)胞離心的時候應(yīng)避免離心力過小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀棄去上清后，應(yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。
（6）吹打細(xì)胞時應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。
公司正在出售的產(chǎn)品：
組織單胺氧化酶（MAO）總活性比色法定量檢測試劑盒
可溶性包涵體蛋白復(fù)性（物理透析）試劑盒（10毫升純化蛋白）
組織HPV7（HUMAN PAPILLOMAVIRUS-7）病毒定量PCR
細(xì)胞CASPASE-10蛋白表達(dá)熒光定量檢測試劑盒
細(xì)胞總氨基酸含量熒光定量檢測試劑盒
TEM電鏡石蠟切片免疫組織化學(xué)AP酶聯(lián)NBT/BCIP間接檢測試劑盒（含AP二抗）
細(xì)胞FLT3激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）
動物細(xì)胞周期S早期同步（SYNCHRONY）處理試劑盒
人載脂蛋白B標(biāo)準(zhǔn)溶液
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體外非細(xì)胞系統(tǒng)細(xì)胞色素P450亞酶2A6（COUMARIN）活性
鈣ATP酶PMCA蛋白免疫共沉淀分析試劑盒
細(xì)胞艾滋病毒1（HIV-1 PROTEASE）活性熒光淬滅法
人體胚胎干細(xì)胞條件培養(yǎng)基
載脂蛋白B-mRNA編輯酶復(fù)合物1抗體
鈣調(diào)磷酸酶A/鈣依賴磷酸酶A抗體
清道夫受體A亞型5抗體
Irx3蛋白抗體
細(xì)胞分裂周期蛋白23抗體
XRN1蛋白抗體
跨膜蛋白16A/鈣激活氯離子通道單克隆抗體
APC標(biāo)記人CD41單克隆抗體
人睪丸支持細(xì)胞永生化鋅指蛋白743抗體
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