傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和生長密度，當細胞生長密度達到80%~90%時，即可進行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)有70%~80%細胞收縮變圓、細胞間隙變大時，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細胞，輕輕吹打混勻，使細胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間，甚至進行細胞凍存。

COLO320 HSR人結(jié)直腸腺癌細胞

細胞基本屬性：

細胞詳細介紹：

二、懸浮細胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實驗室中懸浮細胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細胞碎片的情況下）。當在顯微鏡下觀察到懸浮細胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細胞懸液變黃）時，即可進行傳代。

（1）嚴格進行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時可用預(yù)實驗的方法選擇適當?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對于維持細胞生存，促進細胞生長起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻或預(yù)實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實驗完成。

（4）消化細胞時應(yīng)避免消化時間過短導(dǎo)致消化不收集到的細胞數(shù)量少，或消化時間過長導(dǎo)致細胞成團塊樣絮狀游離，這時的細胞已有損傷或死亡，影響細胞數(shù)量和實驗進度。

（5）細胞離心的時候應(yīng)避免離心力過小收集的細胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細胞產(chǎn)生損傷。離心后的細胞沉淀棄去上清后，應(yīng)先彈散細胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)毎麚p傷小，可以提高細胞活率。

（6）吹打細胞時應(yīng)盡量避免細胞的產(chǎn)生，以免損傷細胞，影響細胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

FNIP1： 卵泡刺激素結(jié)合蛋白1抗體 人上皮細胞;Ca Ski

HBE細胞，人支氣管上皮細胞 小鼠飼養(yǎng)層上皮細胞,HPT-8細胞 CL-0170NG108-15(小鼠神經(jīng)細胞瘤與大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤之融合細胞)5×106cells/瓶×2 豚鼠膽囊收縮素/腸促肽(CCK)ELISA試劑盒 Goat Anti-Bovine IgG/Cy3 Cy3標記的羊抗IgG 0.1ml

FHL2： 相互作用蛋白FHL2抗體 P4HB Others Mouse 小鼠 P4HB / ERBA2L 人細胞裂解液 (陽性對照)

卵巢顆粒細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) 豚鼠脂酶(CHE)ELISA試劑盒 Goat Anti-Chicken IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的羊抗雞IgG 0.1ml

FADS1： 脂肪酸去飽和酶1抗體 MEF, 小鼠胚胎成纖維細胞 Mouse

GDNF Others Human 人 GDNF 人細胞裂解液 (陽性對照) 大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子C(VEGF-C)ELISA試劑盒 Phaseolus vulgaris agglutinin,PHA  菜豆凝集素 96T

MEPE： 細胞外基質(zhì)0酸化抗體 人絨毛間葉成纖維細胞RNAHVMF miRNA5 μg

MKN-45人胃癌細胞 Human gasic cancer cells MKN-45 1640+10% FBS 大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子C(VEGF-C)ELISA 試劑盒 Ep-CAM/CD362(Human Epithelial Cell Adhesion Molecule)  人上皮細胞粘附分子 96T

Mast Cell Tryptase： 肥大細胞蛋白酶7抗體 DKK1 Others Rhesus 恒河猴 DKK-1 / Dkk1 人細胞裂解液 (陽性對照)

MGC80-3(MGC-803)人胃癌細胞 大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子B(VEGF-B)ELISA試劑盒 IL-32  大鼠白介素32 96T

COLO320 HSR人結(jié)直腸腺癌細胞ANGPT4 Protein Human 重組人 Angiopoietin 4 / ANG4 / ANGPT4 蛋白 (His 標簽) 人谷酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA 試劑盒 CTBP1(C-terminal binding protein 1) C端結(jié)合蛋白1抗原 0.5mg

HRH4： 組織胺H4受體抗體 ADAM15 Others Human 人 ADAM15 CHO細胞裂解液 (陽性對照)

人肺泡上皮細胞培養(yǎng)基 100mL 人谷酸脫羧酶(GAD)ELISA 試劑盒 CTLA-4/CD152 淋巴細胞相關(guān)抗原4/細胞毒性T細胞抗原-4 0.5mg

HSD11B2： 羥基類固醇脫氫酶11β2抗體 鼬肺上皮細胞;MV-1-Lu 胰腺癌細胞，PANC-1細胞 3T3 clone A31細胞，小鼠胚胎成纖維細胞

CN3 Others Rat 大鼠 Coactin 3 / CN3 人細胞裂解液 (陽性對照) 人谷酸脫氫酶(GDH)ELISA 試劑盒 CTn1 (cardiac troponin 1) 心肌肌鈣蛋白 0.5mg