傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和生長密度，當細胞生長密度達到80%~90%時，即可進行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)有70%~80%細胞收縮變圓、細胞間隙變大時，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細胞，輕輕吹打混勻，使細胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間，甚至進行細胞凍存。

SNU-387人肝癌細胞

細胞基本屬性：

細胞詳細介紹：

二、懸浮細胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實驗室中懸浮細胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細胞碎片的情況下）。當在顯微鏡下觀察到懸浮細胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細胞懸液變黃）時，即可進行傳代。

（1）嚴格進行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時可用預實驗的方法選擇適當?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對于維持細胞生存，促進細胞生長起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻或預實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應保持用至實驗完成。

（4）消化細胞時應避免消化時間過短導致消化不收集到的細胞數(shù)量少，或消化時間過長導致細胞成團塊樣絮狀游離，這時的細胞已有損傷或死亡，影響細胞數(shù)量和實驗進度。

（5）細胞離心的時候應避免離心力過小收集的細胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細胞產(chǎn)生損傷。離心后的細胞沉淀棄去上清后，應先彈散細胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)毎麚p傷小，可以提高細胞活率。

（6）吹打細胞時應盡量避免細胞的產(chǎn)生，以免損傷細胞，影響細胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

phospho-FAK(Ser910)： 0酸化粘著斑激酶抗體 小鼠淋巴瘤細胞;EL4 小鼠胰腺上皮細胞培養(yǎng)基 100mL

CREB3L1 Others Human 人 CREB3L1 / OASIS (aa 396-519) 人細胞裂解液 (陽性對照) 小鼠1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD glucosidase)ELISA 試劑盒 IgG whole serum 驢抗羊IgG抗血清 1ml

Phospho-FAK(Tyr576)： 0酸化粘著斑激酶抗體 正常小鼠Sertoli細胞;TM4

PG49細胞，人肺腺癌細胞系 轉(zhuǎn)S9基因倉鼠卵巢細胞,ZA1細胞 CL-0042BxPC-3(人原位胰腺腺癌細胞)5×106cells/瓶×2 小鼠1,25-二羥基維生3(DHVD3)ELISA試劑盒 Donkey anti-GIgG whole serum 驢抗豚鼠IgG抗血清 1ml

FAKD3： 下頜發(fā)育不良綜合征相關(guān)蛋白FAKD3抗體 ACRV1 Others Human 人 SP-10 / ACRV1 人細胞裂解液 (陽性對照)

MOBP： 少突膠質(zhì)細胞髓鞘相關(guān)蛋白抗體 615小鼠癌瘤株;Ca759

KiMA(人胚腎上皮細胞系) 5×106cells/瓶×2 艱難梭菌Closidium difficile 大鼠血小板生成素(TPO)ELISA 試劑盒 LZM (Rabbit Lysozyme)  兔 96T

MRCK alpha： CDC42結(jié)合蛋白激酶α抗體 CM-H022人前列腺成纖維細胞培養(yǎng)基100mL

IFNA5 Protein Rat 重組大鼠 IFNA5 / IFNaG 蛋白 (His 標簽) 大鼠血小板內(nèi)皮細胞粘附分子1(PECAM1)ELISA試劑盒 IFN- Beta/IFNB(Human Interferon Beta)  人β干擾素 96T

MyD88： 髓樣分化蛋白抗體 SRC Others Human 人 SRC Kinase / Proto-oncogene c-Src 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

SNU-387人肝癌細胞HuH-7(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2 GH3, 大鼠垂體生長激素腺瘤 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0928 人基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)ELISA 試劑盒 CD24 CD24抗原 0.5mg

Hemopexin： 糖蛋白β-1B抗體 人支氣管平滑肌細胞cDNAHBSMC cDNA

UMR-106(大鼠骨肉瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 人基質(zhì)γ羧基谷酸蛋白(MGP)ELISA 試劑盒 CD2AP (CD2-associated protein) 白細胞分化抗原CD2AP 0.5mg

Phospho-HSP27 (Ser15)： 0酸化熱休克蛋白27抗體 IL17RB Others Human 人 IL17BR / IL17RB / IL-17 Receptor B 人細胞裂解液 (陽性對照)

C57BL/6小鼠骨髓間質(zhì)干細胞 C57BL/6 mouse bone marrow mesenchymal stem cells 人基脲敏感性胺氧化酶(SSAO)ELISA試劑盒 CD33/Siglec-3(mouse ret) CD33抗原(大、小鼠) 0.5mg