C3A人永生化肝細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度，當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶?jī)?nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀(guān)察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過(guò)度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀(guān)察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿(mǎn)至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無(wú)菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無(wú)菌，且須在無(wú)菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長(zhǎng)。來(lái)源于不同動(dòng)物種類(lèi)、組織類(lèi)型的細(xì)胞，對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)起著關(guān)鍵作用。可根據(jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過(guò)短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過(guò)小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過(guò)大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴?，?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過(guò)程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

FANCC： 范可尼綜合征相關(guān)蛋白FANCC抗體 人小梁網(wǎng)細(xì)胞(HTMC)(5×105)

雜交瘤(B類(lèi));Z1510A2G6A2C7 小鼠(E)ELISA 試劑盒 IgG 小鼠抗IgG 1mg

FXYD6： FXYD離子轉(zhuǎn)運(yùn)調(diào)節(jié)因子6抗體 小鼠前胃癌細(xì)胞;MFC 小鼠甲狀腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL

DDR2 Others Human 人 DDR2 Kinase / CD167b 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 豌豆凝集素(PSA)ELISA 試劑盒 IgG 兔抗IgG 1mg

FYB： Fyn結(jié)合蛋白抗體 轉(zhuǎn)PYTL基因小鼠支持細(xì)胞;15P-1

表皮角化細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) 大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA 試劑盒 Cobra venom factor,CVF  毒蛇因子 96T

Phospho-Myt1(Ser83)： 0酸化髓鞘轉(zhuǎn)錄因子1抗體 615小鼠癌瘤株;Ca761

KP-N-NS(人腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞(腦轉(zhuǎn)移)) 5×106cells/瓶×2 破傷風(fēng)桿菌/梭菌Closidium tetani 大鼠血小板激活因子(PAF)ELISA試劑盒 MUC5B  小鼠粘蛋白/粘液素5B 96T

Mre11： DNA損傷關(guān)鍵蛋白Mre11抗體 CM-H029人臍帶單核細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

IFNW1 Protein Human 重組人 IFN omega 1 / IFNW1 蛋白 (His 標(biāo)簽) 大鼠血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒 PRL (Rabbit prolactin)  兔子催乳素 96T

C3A人永生化肝細(xì)胞人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細(xì)胞;NK-92MI [NK92MI] 人肌養(yǎng)蛋白(dysophin)ELISA 試劑盒 CD38(human) CD38抗原(人) 0.5mg

HPL： 人胎盤(pán)泌乳素抗體 Sars結(jié)構(gòu)蛋白表達(dá)株;293 001B

Hut-102(人皮膚T淋巴瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 SKOV3/Taxol-25, 人卵巢癌耐藥細(xì)胞株 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY1022 人肌細(xì)胞生成素(MYOG)ELISA 試劑盒 CD36 CD36(多肽) 0.5mg

HSP27： 熱休克蛋白27抗體 人肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞cDNAHPAEC cDNA

UM-UC-3(人膀胱移行細(xì)胞癌) 5×106cells/瓶×2 人肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)ELISA 試劑盒 CD7 CD7抗原 0.5mg