傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度，當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶?jī)?nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

6T-CEM人T細(xì)胞白血病細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌，且須在無菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長(zhǎng)。來源于不同動(dòng)物種類、組織類型的細(xì)胞，對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過長(zhǎng)導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴?，?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

TSPAN8 Others Human 人 TSPAN8 / Teaspanin 8 / TM4SF3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 小鼠白介素1β(IL1β)ELISA試劑盒 phospho-14-3-3 protein zeta + delta (Ser58)： 0酸化14-3-3 α/β/ζ抗體 小鼠結(jié)締組織L細(xì)胞株929克隆;L-929 [L929]

CCC-HPE-2細(xì)胞，人胚胎胰腺組織來源細(xì)胞 人舌癌細(xì)胞系,Tca8113-P160細(xì)胞 tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類);P19-CAG-tTA-3C3 小鼠白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒 phospho-14-3-3 Tau (Ser232)： 0酸化14-3-3 τ抗體 ERBB2 Others Rat 大鼠 ErbB2 / HER2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人臍靜脈平滑肌細(xì)胞cDNAHUVSMC cDNA 小鼠白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒 Phospho-5-Lipoxygenase(Ser271)： 0酸化5-脂氧合酶抗體 FO 小鼠骨髓瘤細(xì)胞

Promocell C-22070 Myocyte GrowthMedium, 心肌細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基(即用型) 500ml 小鼠白介素1β(IL-1B)ELISA試劑盒 Phospho-5-Lipoxygenase(Ser663)： 0酸化5-脂氧合酶抗體 原代成纖維細(xì)胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝：1ml

JEG-3(人絨毛膜癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠白介素1β (IL-1β)ELISA 試劑盒 phospho-Alpha synuclein (Tyr125)： 0酸化核突觸蛋白α抗體 人少突膠質(zhì)前體細(xì)胞(HOPC-os)(懸浮生長(zhǎng))

Lxn/Latexin： 羧肽酶抑制劑抗體 LAMP1 Others Human 人 LAMP1 / CD107a 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人胃平滑肌細(xì)胞HGSMC 大鼠腫瘤壞死因子受體超家族成員1A(TNFRSF1A)ELISA試劑盒 Dog IgM/Cy3 熒光素Cy3標(biāo)記狗IgM 0.1ml

LCAT： 卵0酯?；D(zhuǎn)移酶抗體 小鼠畸胎瘤細(xì)胞;P19

BC3H1(小鼠腦瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人表皮角質(zhì)細(xì)胞-HEK-a 大鼠腫瘤壞死因子受體超家族成員11A(TNFRSF11A/RANK)ELISA試劑盒 dog IgG/PE 熒光素PE標(biāo)記狗IgG 0.1ml

LPL/PLASTIN2： 脂蛋白脂酶抗體 CL-0057CCL-149(大鼠肺泡上皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

6T-CEM人T細(xì)胞白血病細(xì)胞Heparanase： 乙酰肝素酶抗體 CD200R1L Others Cynomolgus 食蟹猴 CD200RLa 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

大鼠肺泡巨噬細(xì)胞;NR8383[AgC11x3A; NR8383.1] 人可溶性髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1(sEM-1)ELISA試劑盒 SDF-1/CXCL12 基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1 0.5mg

Heparanase 2： 乙酰肝素酶2抗體 人肺成纖維細(xì)胞;HFL1

CRFK(貓腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0190RAW 264.7(小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞;PC-12 [PC12] 人可溶性瘦素受體(sLR)ELISA 試劑盒 ADCY1 peptide 腺苷酸環(huán)化酶1多肽抗原 0.5mg

human serum： 人血清抗體 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KM9801