傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度，當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶?jī)?nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過(guò)度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

Lenti-X293T人腎上皮細(xì)胞系

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無(wú)菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無(wú)菌，且須在無(wú)菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長(zhǎng)。來(lái)源于不同動(dòng)物種類、組織類型的細(xì)胞，對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過(guò)短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過(guò)小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過(guò)大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴螅瑧?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過(guò)程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

Promocell C-22010 Endothelial Cell Growth Medium, 內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基(即用型) 500ml 小鼠白介素28A(IL-28A)ELISA試劑盒 5HT3C： 5-羥色胺受體3C抗體 成骨細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

HuH-7(人肝癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠白介素28(IL-28)ELISA試劑盒 5HT3D + 5HT3E Receptor： 5-羥色胺受體3D+3E抗體 人脈絡(luò)絲表皮細(xì)胞 (HCPEpiC)( 5×105 )

中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS3 小鼠白介素28(IL-28)ELISA試劑盒 5HT3D Receptor： 5-羥色胺受體3D抗體 人皮膚鱗癌細(xì)胞;A-431 [A431] 大鼠小腸粘膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL

CDH8 Others Rat 大鼠 Cadherin-8 / CDH8 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 小鼠白介素27(IL27)ELISA試劑盒 5HT4 Receptor： 5-羥色胺受體4抗體 大鼠肝細(xì)胞瘤;H4-II-E-C3

JF-305細(xì)胞，人胰腺癌細(xì)胞 人皮膚癌細(xì)胞系,HS-1細(xì)胞 KM小鼠腦神經(jīng)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤瘤株;G422 小鼠白介素27(IL-27)ELISA試劑盒 5HT4 Receptor： 5-羥色胺受體4抗體 EFNA2 Others Mouse 小鼠 EFNA2 / Ephrin-A2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

Phospho-LAT (Tyr161)： 0酸化T細(xì)胞活化連接蛋白抗體 MiaPaCa-2, 人胰腺癌細(xì)胞 非雄激素依賴型前列腺癌,Tsu-Pr1細(xì)胞 ZR-75-1(癌細(xì)胞)

HA Others H10N9 甲型流感 H10N9 (A/duck/HongKong/562/1979) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 大鼠重肽神經(jīng)絲蛋白(NEFH)ELISA試劑盒 Monkey IgG/Cy3 熒光素Cy3標(biāo)記猴IgG 0.1ml

Phospho-LAT (Tyr200)： 0酸化T細(xì)胞活化連接蛋白抗體 豚鼠皮膚細(xì)胞;GP-S3

Raji人Butt's淋巴瘤細(xì)胞 Raji human Butt's lymphoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS 大鼠腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因KISS1蛋白(KISS1/Kisspeptin 1)ELISA試劑盒 Monkey IgM/Cy3 熒光素Cy3標(biāo)記猴IgM 0.1ml

LRP1/CD91： 低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白1抗體 SERPINA7 Others Human 人 SerpinA7 / TBG 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

Lenti-X293T人腎上皮細(xì)胞系GPR85： G蛋白偶聯(lián)受體GPR85蛋白抗體 家貓腎細(xì)胞;CATK1 肝細(xì)胞，HL-7702細(xì)胞 MMQ細(xì)胞，大鼠垂體瘤細(xì)胞

IGFBP4 Others Cynomolgus 食蟹猴 IGFBP4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 人狂犬病抗體(RV-Ab)ELISA試劑盒 Caspase-3 (CPP32) 半胱胺酸蛋白酶蛋白-3(抗原) 0.5mg

Gentamicin： 慶大抗體 神經(jīng)少突起前質(zhì)膠質(zhì)細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

Hat-78細(xì)胞，人T細(xì)胞淋巴瘤 小鼠腎癌細(xì)胞,Ranca細(xì)胞 人食道平滑肌細(xì)胞cDNAHESMC cDNA 人狂犬病毒抗原ELISA試劑盒 Caspase-6 (CT) 半胱胺酸蛋白酶蛋白-6(抗原) 0.5mg

Galectin 9： 半乳糖凝集素9抗體 RBP4 Others Mouse 小鼠 RBP4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)