NCI-H2228人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長密度，當(dāng)細(xì)胞生長密度達(dá)到80%~90%時，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時，即可進(jìn)行傳代。

公司正在出售的產(chǎn)品：

GNRHR2： 促性腺素釋放激素受體2抗體 SK-N-SH, 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 Human

A-431(人表皮癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H131人角膜成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL 人羊膜細(xì)胞;HA 人嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin 2(Eotaxin 2/CCL24)ELISA 試劑盒 IgM/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗小鼠IgM 0.1ml

GPR106： G蛋白偶聯(lián)受體106抗體 犬腎細(xì)胞;MDCK(NBL-2)

KATO III(人胃癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)ELISA 試劑盒 IgM/APC APC標(biāo)記的兔抗小鼠IgM 0.1ml

G1switch 2： G0/G1期開關(guān)調(diào)節(jié)蛋白2抗體 SLC27A4 Others Human 人 SLC27A4 / FATP4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

大額牛皮膚細(xì)胞;BFR-S3 大鼠內(nèi)皮素(ET-1)ELISA試劑盒 Human Oncogene Protein p190/bcr-abl  人癌基因蛋白質(zhì)p190/bcr-abl 96T

NMS： 神經(jīng)調(diào)節(jié)肽S抗體 中國倉鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K1

人食道上皮細(xì)胞(HEEC)(5×105 ) RN-c, 大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元 Rattus 大鼠內(nèi)皮素(ET)ELISA 試劑盒 BTA(Human Bladder tumor antigen)  人膀胱抗原 96T

Nocturnin： 分子生物鐘調(diào)控蛋白NOC抗體 小鼠成肌細(xì)胞;C2C12

IL3 Protein Human  IL-3 / Ierleukin-3 蛋白 (His 標(biāo)簽) 大鼠內(nèi)凝集蛋白1(ITLN1)ELISA試劑盒 AQP-0(Mouse Aquaporin 0)  小鼠水通道蛋白0 96T

NCI-H2228人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞LS 180(人結(jié)腸腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 原代上皮細(xì)胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝：1ml 霉毒素(Aflatoxin)ELISA 試劑盒 CD68 CD68(多肽抗原) 0.5mg

ERG/KCNH2： 特異性離子通道蛋白抗體 HUVEC, 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞

EFNB2 Protein Human  Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (His 標(biāo)簽) 貓細(xì)小病毒抗體(FPV)ELISA 試劑盒 ChAT(Choline Acetyltransferase) 乙酰轉(zhuǎn)移酶(抗原) 0.5mg

KIF4A： 沉默驅(qū)動蛋白KIF4A抗體 PDE3A Others Human 人 PDE3A 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 貓α干擾素(IFN-α)ELISA 試劑盒 CD36L1/SRB1 高密度脂蛋白受體/清道夫受體抗原 0.5mg

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細(xì)胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時應(yīng)避免消化時間過短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時間過長導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時候應(yīng)避免離心力過小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴?，?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。