PC-9人肺癌細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度，當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶?jī)?nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過(guò)度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無(wú)菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無(wú)菌，且須在無(wú)菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長(zhǎng)。來(lái)源于不同動(dòng)物種類、組織類型的細(xì)胞，對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過(guò)短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過(guò)小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過(guò)大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴螅瑧?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過(guò)程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

HUF-c 人類子宮成纖維細(xì)胞(HUF) 500,000cells 腎上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) 豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA試劑盒 Goat Anti-Chicken IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的羊抗雞IgG 0.1ml

FABP6： 回腸脂肪酸結(jié)合蛋白抗體 CM-R008大鼠支氣管成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

U-87 MG(人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA 試劑盒 IgG/FITC FITC標(biāo)記的兔抗雞IgG 0.3ml

FABP4： 脂肪細(xì)胞型脂肪酸結(jié)合蛋白 0.1ml

生長(zhǎng)激素受體抗體 人臍帶間葉干細(xì)胞(臍帶)(HUMSC) (5×105)

MAP4： 微管相關(guān)蛋白4抗體 艾氏腹水瘤瘤株;Ehrlich

NCI-H157(人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 SRSV/3T3(SRSV轉(zhuǎn)化的3T3細(xì)胞) 大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子B(VEGF-B)ELISA 試劑盒 Lep IgG (Rabbit Leptospira IgG)  兔鉤端IgG 96T

MSS1： 26S蛋白酶調(diào)節(jié)亞型7抗體 大額牛與婆羅門(mén)牛雜交F1代皮膚成纖維樣細(xì)胞;BOS-5

IFNG Protein Mouse 重組小鼠 IFNG / Ierferon Gamma 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) 大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISA試劑盒 Sam(Human soluble adhesion molecules)  人可溶性粘附分子 96T

MEG1： 蛋白酪酸0酸酶非受體型4抗體 IL2RG Others Human 人 IL2RG / CD132 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

PC-9人肺癌細(xì)胞HRH3： 組織胺H3受體抗體 CL-0130K-562(人慢性骨髓性白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

M14細(xì)胞，人黑色素瘤細(xì)胞 枯草芽孢桿菌黑色變種 人肺癌細(xì)胞;A-427 [A427] 人巰基轉(zhuǎn)移酶(GST)ELISA試劑盒 Cx32(Connexin-32) 間隙連接蛋白32抗原 0.5mg

phospho-Histone H1.4 (Thr146)： 0酸化組蛋白H1抗體 IFNAR1 Others Mouse 小鼠 IFNAR1 / IFNAR 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

非洲綠猴腎細(xì)胞;GL-37 人硫轉(zhuǎn)移酶pi基因(GSTpi)ELISA 試劑盒 CX36 (Connexin-36) 間隙連接蛋白36抗原 0.5mg

HEATR4： HEATR4蛋白抗體 人肝永生化細(xì)胞;THLE-3