儲(chǔ)存條件:
產(chǎn)品僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
產(chǎn)品名稱:水稻內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)oriazain基因PCR試劑盒
運(yùn)輸:低溫
保存:負(fù)20度
有效期:一年
貨期:2-3周
注意事項(xiàng):
1.基礎(chǔ)程序;
2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;
3.反應(yīng)時(shí)間;
4.循環(huán)次數(shù);
5.PCR 反應(yīng)液的配制;
6.PCR技術(shù)的基本原理;
7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);
8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;
9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。點(diǎn)擊了解更公司產(chǎn)品。
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
凝結(jié)芽孢桿菌 種屬:Bacillus coagulans 提供形式 凍干物安全等級(jí) 1模式菌株 no
Loktanellafryxellensis 種屬:Loktanellafryxellensis 安全等級(jí) 1模式菌株 yes應(yīng)用領(lǐng)域 模式菌株
Shimiamarina 種屬:Shimiamarina 分離基物 韓國(guó)沿海養(yǎng)魚(yú)場(chǎng)的生物膜安全等級(jí) 1模式菌株 yes
Marivitalitorea 種屬:Marivitalitorea 分離基物 朝鮮東海岸的沿海海水安全等級(jí) 1模式菌株 yes
Gramellaportivictoriae 種屬:Gramellaportivictoriae 分離基物 香港維多利亞港的沉積物安全等級(jí) 1模式菌株 yes
居海洛克氏菌 種屬:Loktanellamaricola 分離基物 海水安全等級(jí) 1模式菌株 yes
Aquimarinamuelleri 種屬:Aquimarinamuelleri 分離基物 培養(yǎng)基海水樣本,日本安全等級(jí) 1模式菌株 yes
魯氏不動(dòng)桿菌 種屬:Acinetobacter lwoffii 描述 革蘭陰性球狀菌,呈多形性,成對(duì)排列或呈短鏈,無(wú)芽胞及鞭毛,無(wú)動(dòng)力,有莢膜。專性需氧,硝酸鹽反應(yīng)及氧化酶試驗(yàn)陰性,寄主名稱 草魚(yú)致病對(duì)象 動(dòng)物
假單胞菌 種屬:Pseudomonas sp. 描述 革蘭氏陰性桿菌,長(zhǎng)2.5-3μm,寬0.5-1.0μm,呈桿狀,兩端鈍圓,無(wú)芽胞,有鞭毛。本菌為兼性厭氧,但易在表面生長(zhǎng)。適生長(zhǎng)溫度為37℃,pH5-7范圍內(nèi)生長(zhǎng)較好。寄主名稱 草魚(yú)致病對(duì)象 動(dòng)物
黑座克雷伯氏菌 種屬:Klebsiella variicola 描述 短粗的桿菌,大小0.5~0.8×1~2um,單獨(dú)、成雙或短鏈狀排列。無(wú)芽胞,無(wú)鞭毛,有較厚的莢膜,營(yíng)養(yǎng)要求不高,有普通瓊脂培養(yǎng)基上形成較大的灰白色粘液菌落。致病對(duì)象 動(dòng)物
菠蘿泛菌 種屬:Pantoea ananatis 描述 細(xì)胞呈直桿狀,以周生鞭毛運(yùn)動(dòng),兼性厭氧,具有代謝和發(fā)酵類型的化能異養(yǎng)菌。適溫度30℃。 D-葡萄糖和其他糖類可產(chǎn)酸,但不產(chǎn)氣。氧化酶陰性,接觸酶陽(yáng)性,吲哚陰性,M-R可變。賴氨酸和鳥(niǎo)氨酸脫羧酶以及精氨酸雙水解酶皆陰性。丙二酸鹽利用在菌株間可變。還原硝酸鹽??砂l(fā)酵的糖類:L-阿拉伯糖、 D-乳糖、麥芽糖、蔗糖、海藻糖和木糖。 寄主名稱 草魚(yú)
產(chǎn)堿桿菌 種屬:Alcaligenes sp. 描述 桿狀或短桿狀,0.5~1.2×0.5~2.6μm,借1~4根周生鞭毛運(yùn)動(dòng)。革蘭氏染色陰性直桿菌,無(wú)芽孢。異養(yǎng)型、需氧菌。能利用硝酸鹽進(jìn)行無(wú)氧生長(zhǎng)。寄主名稱 草魚(yú)致病對(duì)象 動(dòng)物
維隆氣單胞菌 種屬:Aeromonas veronii 描述 細(xì)胞桿狀,兩端圓形,G-,一根端生鞭毛運(yùn)動(dòng)。分解碳水化合物產(chǎn)酸或產(chǎn)酸又產(chǎn)氣。有氧化酶和接觸酶。適生長(zhǎng)溫度為30℃,pH5.5~9。寄主名稱 草魚(yú)致病對(duì)象 動(dòng)物
里拉微球菌 種屬:Micrococcus lylae 描述 細(xì)胞球形,直徑0.5~3.5μm,單生、成對(duì)或形成四聯(lián)、八疊,或呈不規(guī)則聚集。一般不運(yùn)動(dòng),革蘭染色陽(yáng)性,有色的菌落。能氧化葡萄糖成醋酸,或*氧化為CO2和H2O。需氧需維生素,生長(zhǎng)適宜溫度為25~30℃寄主名稱 草魚(yú)致病對(duì)象 動(dòng)物
水稻內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)oriazain基因PCR試劑盒上調(diào)基因4抗體(N端),*,請(qǐng)?jiān)儍r(jià)
上調(diào)基因4抗體(C端),*,請(qǐng)?jiān)儍r(jià)
上皮鋅指蛋白1, 2, 4抗體,*,請(qǐng)?jiān)儍r(jià)
上皮粘連調(diào)控蛋白ESRP2抗體,*,請(qǐng)?jiān)儍r(jià)
上皮特異性抗原抗體,*,請(qǐng)?jiān)儍r(jià)
上皮特異性ETs轉(zhuǎn)錄因子抗體,*,請(qǐng)?jiān)儍r(jià)
IKKα (phospho Thr23) Polyclonal Antibody KB抑制蛋白激酶α (phospho Thr23) 多克隆抗體
KAT8 Antibody (MOF, hMOF, MYST1, ZC2HC8, KAT8) KAT8抗體
KOR-1 (phospho Ser369) Polyclonal Antibody kappa型受體(phospho Ser369) 多克隆抗體
KAP-1 Antibody,KAP1,KRAB-associated protein 1; TF1B,TIF1B,TIF1-beta,transcriptional intermediary factor 1-beta; TRIM28: tripartite motif-containing 28; Nuclear corepressor KAP-1 KAP-1抗體
Kallikrein 12 (KLK12) Antibody,KLKL5,KLK-L5,MGC42603,DKFZp686H1078 Kallikrein 12 (KLK12)抗體
Anti-Kainate Receptor GluK5 (extracellular) Kainate 受體 GluK5 (胞外)抗體(50 ul)
Anti-Kainate Receptor GluK5 (extracellular) Kainate 受體 GluK5 (胞外)抗體(25 ul)
?技術(shù)原理:
DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過(guò)溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。
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