儲存條件:
產(chǎn)品僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
產(chǎn)品名稱:水稻內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)gos9基因探針法PCR試劑盒
運(yùn)輸:低溫
保存:負(fù)20度
有效期:一年
貨期:2-3周
注意事項(xiàng):
1.基礎(chǔ)程序;
2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;
3.反應(yīng)時(shí)間;
4.循環(huán)次數(shù);
5.PCR 反應(yīng)液的配制;
6.PCR技術(shù)的基本原理;
7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);
8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;
9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。點(diǎn)擊了解更公司產(chǎn)品。
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
匣狀粘球菌 種屬:pyxidicoccusfallax 安全等級 1模式菌株 no
過渡原囊菌 種屬:Archangiumgephyra 安全等級 1模式菌株 no
丁酸梭菌 種屬:Clostridiumbutyricum 分離基物 豬的腸道安全等級 1模式菌株 yes
Cystobactergracilis 種屬:Cystobactergracilis 分離基物 植物殘?bào)w和腐殖質(zhì)土壤,西班牙,馬洛卡島安全等級 1模式菌株 no
Roseovariuslitoreus 種屬:Roseovariuslitoreus 分離基物 海水,韓國南海安全等級 1模式菌株 yes
Roseovariushalocynthiae 種屬:Roseovariushalocynthiae 分離基物 海鞘,韓國安全等級 1模式菌株 yes
Roseivivaxsediminis 種屬:Roseivivaxsediminis 分離基物 鹽礦沉積物,堿湖,云南省,中國安全等級 1模式菌株 no
人葡萄球菌 種屬:Staphylococcus hominis 描述 革蘭氏陽性球菌,球形或稍呈橢園形,直徑1.0um左右,排列成葡萄狀。無鞭毛,不能運(yùn)動。無芽胞,不形成莢膜。在普通培養(yǎng)基上生長良好,需氧或兼性厭氧,28-38℃均能生長,在瓊脂平板上形成圓形凸起,邊緣整齊,表面光滑,濕潤的菌落。寄主名稱 動物致病對象 動物
沙地芽孢桿菌 種屬:Bacillus aquimaris 描述 桿狀,末端圓。單個(gè)或呈短鏈排列。1.2~1.5×2.0~4.0微米。能運(yùn)動。革蘭氏陽性。芽孢1.0~1.2×1.5~2.0微米,橢圓形,中生或次端生。液化明膠慢、胨化牛奶、水解淀粉、不還原硝酸寄主名稱 短鰭紅娘魚致病對象 動物
解酪蛋白巨大球菌 種屬:Macrococcus caseolyticus 描述 革蘭氏陽性球菌,球形或稍呈橢園形,直徑1.0um左右,無鞭毛,不能運(yùn)動。無芽胞,不形成莢膜。寄主名稱 媒介致病對象 動物
遲鈍愛得華氏菌 種屬:Edwardsiella tarda 描述 有鞭毛、能運(yùn)動、無莢膜,革蘭染色陰性兼性厭氧桿菌寄主名稱 短鰭紅娘魚致病對象 動物
紅球菌 種屬:Rhodococcus sp. 描述 好氣、革蘭氏陽性、多形態(tài)菌,不游動。部分抗酸。無氣絲(有時(shí)有少量氣絲)。菌落粗糙或光滑、甚至粘液狀,呈淺橙黃色、粉色、橙色或紅色,細(xì)胞壁Ⅳ型寄主名稱 短鰭紅娘魚致病對象 動物
希瓦氏菌 種屬:Shewanella sp. 描述 革蘭氏染色為陰性,細(xì)胞為桿狀,大小為0.6-1.0μm×1.0-4.0μm,周身纖毛,極生單鞭毛,其生長pH范圍為pH7.0—10.0,適生長pH為8.0,生長溫度范圍為4℃-40℃,適生長溫度為20℃-30℃。可利用D-半乳糖、D-葡萄糖、蔗糖、丙酸鈉、L-亮氨酸等多種有機(jī)物為碳源。致病對象 動物
嗜麥芽糖寡養(yǎng)單胞菌 種屬:Stenotrophomonas maltophilia 描述 革蘭氏陰性桿菌,鞭毛染色為極鞭毛菌,每菌鞭毛數(shù)>1。在營養(yǎng)瓊脂上易生長,淡黃或淺黃色菌落。血平板上呈淡紫綠色溶血。氧化發(fā)酵(OF)試驗(yàn)為葡萄糖非發(fā)酵型,但氧化產(chǎn)酸能力較差,有的不顯產(chǎn)酸或開始時(shí)反而微堿,氧化酶試驗(yàn)陰性。致病對象 動物
水稻內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)gos9基因探針法PCR試劑盒小腦脊髓共濟(jì)失調(diào)蛋白3抗體,*,請?jiān)儍r(jià)
小腦變性相關(guān)蛋白2抗體,*,請?jiān)儍r(jià)
小腦肽4抗體,*,請?jiān)儍r(jià)
小腦肽3抗體,*,請?jiān)儍r(jià)
小腦肽2抗體,*,請?jiān)儍r(jià)
小腦肽1抗體,*,請?jiān)儍r(jià)
Anti-KCa2.2 (SK2) KCa2.2 (SK2)抗體(0.2 ml)
Anti-KCa2.1 (SK1, SKCa1) KCa2.1 (SK1, SKCa1)抗體(50 ul)
Anti-KCa2.1 (SK1, SKCa1) KCa2.1 (SK1, SKCa1)抗體(0.2 ml)
Anti-KCa1.1 (BKCa) (extracellular) KCa1.1 (BKCa) (胞外)抗體(50 ul)
Anti-KCa1.1 (BKCa) (extracellular) KCa1.1 (BKCa) (胞外)抗體(25 ul)
Anti-KCa1.1 (BKCa) (extracellular) KCa1.1 (BKCa) (胞外)抗體(0.2 ml)
Anti-KCa1.1 (1184-1200) KCa1.1 (1184-1200)抗體(50 ul)
?技術(shù)原理:
DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。
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