技術(shù)特點(diǎn):
1犬巨球菌PCR檢測(cè)試劑盒多少錢準(zhǔn)確可靠,臨床雙盲對(duì)照試驗(yàn)>1000例,結(jié)果與金標(biāo)準(zhǔn)測(cè)序法比對(duì),結(jié)果*性大于99%。
2高靈敏:可檢測(cè)低至10ng的人基因組DNA。
3快速:整個(gè)檢測(cè)流程只需3小時(shí)。
4簡(jiǎn)便:試劑盒提供預(yù)混好的試劑,使體系配置操作簡(jiǎn)便。
5防污染
6產(chǎn)品僅用于科研高特異性:雙重特異性組成,保證檢測(cè)結(jié)果的特異性和準(zhǔn)確性引物與DNA互補(bǔ)鏈結(jié)合必需*配對(duì),才能延伸。探針特異性與所檢測(cè)基因的PCR產(chǎn)物配對(duì),在延伸中產(chǎn)生熒光。
產(chǎn)品名稱 | 犬巨球菌PCR檢測(cè)試劑盒多少錢 |
英文名稱 | Macrococcus canisPCR |
分類 | PCR檢測(cè)試劑盒 |
產(chǎn)品及特點(diǎn):
1. 即開(kāi)即用,用戶只需要提供伴放線放線桿菌樣品。
2. 根據(jù)伴放線放線桿菌保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物,與相關(guān)病毒無(wú)交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量PCR檢測(cè),避免后續(xù)污染。
5. 產(chǎn)品僅用于科研本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
運(yùn)輸及保存:
低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據(jù)機(jī)型決定,具體見(jiàn)使用方法)。
使用方法:
一、稀釋PCR陽(yáng)性對(duì)照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取,多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽(yáng)性對(duì)照),一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照)??梢杂?0μL上步制備的PCR陽(yáng)性對(duì)照的第4號(hào)(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬(wàn)拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬(wàn)拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行)
10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,6個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照,并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加):
BR,2ml/支10支/盒國(guó)產(chǎn)
植物血球凝集素PHA-M/植物血凝素/PHA-MBR,60-80%100毫克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,9008-97-32~8℃
植物血球凝集素PHA-P/植物血凝素/PHA-PBR,<62.5 μg/ml100毫克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,9008-97-32~8℃
細(xì)胞色素C/細(xì)胞血素C/細(xì)胞色素丙/肌高鐵血紅素/Cytochrome CBR,牛心,95%100毫克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,9007-43-6保存:-20℃
硫酸軟骨素/硫酸軟骨素A /CSA高純,90%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,39455-18-02~8℃,避光
組蛋白A(小牛胸腺)/Histones,dried(Calf thymus)BR250毫克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,9064-47-52~8℃
組蛋白/HistoneBR250毫克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,9064-47-52~8℃
核酸組蛋白(小牛胸腺)/Histones nucleo from calf thymusBR250毫克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,2~8℃
粘蛋白/MucinBR,牛頜下腺100毫克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,84195-52-82~8℃
胃粘膜素/粘液素II/粘液素III/胃膜素/MucinBR,豬腸胃1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,84082-64-42~8℃
蛋白保護(hù)劑TY/Protein protectant TYBR100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,2~8℃
蛋白保護(hù)劑AEP-HBC/ Protein protectant AEP-HBC
復(fù)合蛋白保護(hù)劑HPD/Protein protectant HPD
瓊脂糖蛋白A/Protein A–AgaroseBR250毫克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,2~8℃
犬巨球菌PCR檢測(cè)試劑盒多少錢4-(Methylmercapto)aniline 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
3-Ethylthiophene 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
Pregabalin 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
Neochlorogenic acid 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
ACETYLSALICYLIC ACID METHYL ESTER 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
3,5-Dinitrobenzoyl chloride 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
CADMIUM 2,4-PENTANEDIONATE, HYDRATE 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
Tetracyline Examination Agar 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
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