參數規(guī)格:
產品名稱:羅氏沼蝦諾達病毒PCR檢測試劑盒哪家代理
英文名稱:Macrobrachium Rosenbergii Nodavirus(MrNV)RTPCR
產品規(guī)格:50T
產品運輸:低溫運輸
產品保存:-20℃保存
產品有效期:一年
產品特點:
產品僅用于科研本產品就是根據保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產品。
?羅氏沼蝦諾達病毒PCR檢測試劑盒哪家代理原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經過n個熱循環(huán)擴增,擴增產物中所含特定基因數是原始模板數的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產物中的特定基因成為可能。
產品僅用于科研特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR實驗步驟:
典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應組成一個循環(huán),通過多次循環(huán)反應,使目的DNA得以迅速擴增。其主要步驟是:
將待擴增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個寡核苷酸引物在其合適的復性溫度下分別與目的基因兩側的兩條單鏈互補結合,兩個引物在模板上結合的位置決定了擴增片段的長短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因為模板從5’→3’方向延伸,合成DNA的新互補鏈。
人血纖維蛋白原/血漿凝固因子/Fibrinogen from human plasmaBR,50-70%100毫克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,9001-32-5保存:-20℃
牛血纖維蛋白原/血漿凝固因子/Fibrinogen from bovine plasmaBR,65-85%100毫克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,9001-32-5保存:-20℃
玉米蛋白/黍膠質/玉米朊/玉米醇溶蛋白/ZeinBR,18%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,9010-66-6RT
馬脾鐵蛋白/鐵蛋白(馬脾)/鐵朊/HSFBR25毫克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,9007-73-22~8℃
轉鐵蛋白/鐵傳遞蛋白/Transferrin human/TF/TRFBR,98%10毫克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,11096-37-02~8℃
刀豆球蛋白A/刀豆凝集素A/伴刀豆球蛋白A/伴刀豆凝集素/刀豆凝集素A/刀豆球朊A/ConA親合層析純,1.95ug/ml100毫克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,11028-71-02~8℃
硫酸魚精蛋白/精蛋白硫酸鹽/魚精蛋白硫酸鹽/Protamine sulfateBR,100u/mg1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,53597-25-42~8℃
兔肌動蛋白/Actin from rabbit muscleBR,85%1毫克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,51005-14-22~8℃
γ-球蛋白(牛)/丙種球蛋白/普通丙種球蛋白/γ-Globulins from bovine bloodBR,96-100%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,9007-83-4保存:-20℃
γ-人球蛋白/人丙種球蛋白/普通丙種球蛋白/human γ-globulinBR,96-100%250毫克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,9007-83-4保存:-20℃
牛胰島素/Insulin(bovine pancreas)BR,27U/mg25毫克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,11070-73-8保存:-20℃
透明質酸鈉/玻璃酸鈉/氯化鈉透明質酸/玻璃糖醛酸鈉/Sodium hyaluronateUSP級1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,9067-32-72~8℃
SDS-PAGE蛋白質超低分子量多肽/SDS-PAGE超低分子量標準品/Super low range protein MW marker3400~20100,液體,5條帶20次/160ul/支,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,保存:-20℃
4.1-66kDa低范圍分子量MARK/Low range protein MW marker4100~66000,藍色液體,預染,9條帶10次/30ul/支,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,保存:-20℃
羅氏沼蝦諾達病毒PCR檢測試劑盒哪家代理Casein Agar 質量規(guī)格:>95%,BR
D-Allylglycine 質量規(guī)格:>97%,BR
Cupric chloride 質量規(guī)格:>99%,BR
Anion exchange resin,weak basic styrene 質量規(guī)格:>98%,BR
Sodium hypochlorite 質量規(guī)格:>97%,BR
Potassium trimethylsilanolate 質量規(guī)格:>98%,BR
Iodic acid 質量規(guī)格:>98%,BR
2,4,6-Trimethylaniline 質量規(guī)格:>98%,BR
注意事項:
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.產品僅用于科研所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
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