白介素試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測技術(shù)。特異性抗人IL-6抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣本和生物素化的檢測抗體,經(jīng)過孵育,樣本中存在的IL-6與固相抗體和檢測抗體結(jié)合,形成免疫復(fù)合物。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后,加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素。洗滌后,加入顯色底物,避光顯色。加入終止液終止反應(yīng),在450nm波長測定吸光度值。
白介素試劑盒的使用注意事項(xiàng):
檢試劑盒標(biāo)簽上的有效期。如果超過有效期,請勿使用;
按說明書確定所有試劑齊全(數(shù)量、體積);
標(biāo)本制督要規(guī)范,每份標(biāo)本體積要按2-3個復(fù)孔以上的量制備(貯存),盡量分裝做備分。短期內(nèi)無法實(shí)驗(yàn)者,注意低溫保存;
好所有實(shí)驗(yàn)額外所需物品,(比如移液器,試管,清洗器,酶標(biāo)儀);
安說明書將所用試劑平億至室溫,根據(jù)檢測標(biāo)本數(shù)量確定所需試劑的量;
檢試劑盒內(nèi)每種試劑的貯存條件,保證所有試剤均按照試劑盒內(nèi)說明書推薦的條件存儲;
檢不穩(wěn)定或旾變質(zhì)的試劑溶液(比如沉淀或變色)。有些試剤,比如標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液或者檢汎稀釋液,可能在設(shè)計(jì)時就含有沉淀物。
所有試劑在滴入酶標(biāo)板之前,需充分;
而由于沉淀物的特性,在加入酶標(biāo)板之前,需不??拱?;
切勿使用不同批號的試剤取代現(xiàn)有試剤或泥合現(xiàn)有試劑;
在泥合或溶解蛋白溶液時,遊泡沫產(chǎn)生;
在實(shí)驗(yàn)開始之前,安排好實(shí)驗(yàn)流程;
在實(shí)驗(yàn)開始之前,清潔工作臺。