型 號(hào)
產(chǎn)品時(shí)間2024-11-21
所屬分類細(xì)胞增殖
報(bào)價(jià)3200
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | EdU法細(xì)胞增殖成像分析試劑盒(橙色熒光) | 英文名稱 | EdU Cell Proliferation Image Kit (Orange Fluorescence) |
規(guī)格 | 100 T/500 T | 貨號(hào) | EY-01X8522 |
運(yùn)輸條件 | 藍(lán)冰運(yùn)輸 | 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
背景:
細(xì)胞增殖檢測(cè)是評(píng)估細(xì)胞健康程度、遺傳毒性及抗腫瘤藥物效果的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)手段。檢測(cè)細(xì)胞增殖方法是BrdU法。EdU法檢測(cè)試劑盒是Brdu方法的革命性突破。EdU(5-溴-2-脫氧啶)試劑盒是一種嘧啶類似物,可以在DNA合成期整合入DNA雙鏈。
標(biāo)記:
1.將細(xì)胞培養(yǎng)基與EdU溶液按照500:1的比例混合,制成2×EdU標(biāo)記培養(yǎng)基。
2.提前將2×EdU標(biāo)記培養(yǎng)基預(yù)熱,然后將150微升2×EdU標(biāo)記培養(yǎng)基與等體積細(xì)胞培養(yǎng)基混合,獲得1×EdU溶液。
【注】:①不建議替換全部培養(yǎng)基,這樣可能會(huì)影響細(xì)胞增殖的速度。②配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配,用量以沒(méi)過(guò)細(xì)胞為宜。
3.孵育細(xì)胞2 h,棄培養(yǎng)基。
【注】:①培養(yǎng)時(shí)間取決于細(xì)胞的增殖速度和生長(zhǎng)狀態(tài)。②大多數(shù)腫瘤細(xì)胞以及粘附細(xì)胞系均可采用2 h的孵育時(shí)間。
4.以1xPBS清洗細(xì)胞兩次,每次5 min, 以除去未摻入DNA的EdU殘留。
【注】:對(duì)于貼壁不牢的細(xì)胞可降低清洗強(qiáng)度。
實(shí)驗(yàn)步驟:
1. 將細(xì)胞以 104-105 個(gè)細(xì)胞/孔的密度接種在 96 孔板 中,加入 100μL 培養(yǎng)基,含或不含待測(cè)化合物。在 CO2 培養(yǎng)箱中在 37℃ 下培養(yǎng)細(xì)胞 24 小時(shí)。
2. 向板中加入 10μL 不同濃度的待測(cè)物質(zhì)。
3. 在培養(yǎng)箱中將培養(yǎng)板培養(yǎng)適當(dāng)時(shí)間(如 6、12、24 或 48 小時(shí))。
4. 向板的每個(gè)孔中加入 10μL CCK-8 溶液。小心不要將氣泡引入孔中。
5. 將平板在培養(yǎng)箱中孵育 1-4 小時(shí)。
6. 在讀板之前,在定軌振蕩器上輕輕混勻。
7. 使用酶標(biāo)儀測(cè)量 450nm 處的吸光度。
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