產品名稱 | 大鼠肝外膽管上皮細胞 | 貨號 | EY-XY3432 |
英文名稱 | Rat Extrahepatic Bile Duct Epithelial Cells | 規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 |
質量檢測:廣譜角蛋白(PCK)免疫熒光染色為陽性,純度高于 90%,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等
產品規(guī)格:5x105cells/T25或1mL凍存管
培養(yǎng)基:大鼠肝外膽管上皮細胞培養(yǎng)基
培養(yǎng)條件:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
換液頻率:每2-3天換液一次
消化液:0.25%
產品貨期現貨,1周左右
運輸方式T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞(包郵)
供應限制僅限于科學研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用
大鼠肝外膽管上皮細胞采用膠原酶灌注消化法后,再用膠原酶-DNA酶聯合消化,接種至預先包被鼠尾膠原的培養(yǎng)瓶中,通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,大鼠肝外膽管上皮細胞分離自肝外膽管組織;肝臟是身體內以代謝功能為主的一個器官,并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質的合成等作用;肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機體內臟里最大的器官,位于機體中的腹部位置,在右側橫隔膜之下,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,胃的上方。肝臟是機體消化系統(tǒng)中最大的消化腺,為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官, |
收貨處理取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2,飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)
傳代密度細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)
傳代代數可傳5代左右;3代以內狀態(tài)最佳
傳代比例傳代建議1:2傳代,1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿
傳代方法
1.吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml培養(yǎng)基終止消化;
3.用吸管輕輕吹打混勻,按1:2比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);
4.待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后每2-3天換液一次新鮮的培養(yǎng)基。
1.準備:取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面,紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2.布局:點燃酒精燈,安裝吸管帽。
3.處理組織:把組織塊置于燒杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如懷疑組織可能污染,可先置于含有青的混合液中30~60分鐘。
4.剪切:用眼科剪把組織切成2~3毫米大小的塊,以便于消化。加入比組織塊總量多30~50倍的液,然后一并倒入三角燒瓶中,結扎瓶口或塞以膠塞。
5.消化:或用恒溫水浴,或置于37℃溫箱消化均可,消化中每隔20分鐘應搖動一次,如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。
6.分離:在消化過程中見消化液發(fā)混濁時,可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察,如組織已分散成細胞團或單個細胞,立即終止消化,隨即通過適宜不銹鋼篩,濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速(500~1000轉/分)離心消化液5分鐘,吸出上清,加入適量含有血清的培養(yǎng)液。
7.計數:用計數板計數,如細胞懸液細胞密度過大,再補加培養(yǎng)液調整后,分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數細胞來說,pH要求在7.2~7.4范圍,培養(yǎng)液呈微紅色,如顏色偏黃,說明液體變酸,可用NaHCO3調整。
8.培養(yǎng):置于36.5℃溫箱培養(yǎng),如用CO2溫箱培養(yǎng),瓶蓋需擰松半圈。
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