儲(chǔ)存條件:
產(chǎn)品僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
產(chǎn)品名稱:棉花內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)sad1基因探針法PCR試劑盒
運(yùn)輸:低溫
保存:負(fù)20度
有效期:一年
貨期:2-3周
注意事項(xiàng):
1.基礎(chǔ)程序;
2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;
3.反應(yīng)時(shí)間;
4.循環(huán)次數(shù);
5.PCR 反應(yīng)液的配制;
6.PCR技術(shù)的基本原理;
7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);
8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;
9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。點(diǎn)擊了解更公司產(chǎn)品。
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
大孢珊瑚球菌 種屬:Corallococcusmacrosporus 分離基物 斯里蘭卡安全等級(jí) 1模式菌株 yes
珊瑚狀珊瑚球菌 種屬:Corallococcuscoralloides 分離基物 腐爛的木材和其它植物材料的土壤,南非安全等級(jí) 1模式菌株 no
Sphingomonasjaponica 種屬:Sphingomonasjaponica 安全等級(jí) 1模式菌株 yes應(yīng)用領(lǐng)域 模式菌株
腸沙門氏菌腸炎亞種 種屬:Salmonellaentericasubsp.enterica 安全等級(jí) 1模式菌株 no
遲緩愛德華氏菌 種屬:Edwardsiellatarda 安全等級(jí) 1模式菌株 no
Massiliatieshanensis 種屬:Massiliatieshanensis 安全等級(jí) 1模式菌株 yes應(yīng)用領(lǐng)域 模式菌株
恥垢分枝桿菌 種屬:Mycobacteriumsmegmatis 分離基物 人安全等級(jí) 1模式菌株 no
嗜糖假單胞桿菌 種屬:Pseudomonas saccharophila 描述 菌落圓形扁平,乳白色,表面光滑濕潤(rùn),有光澤,邊緣不規(guī)則。在高氏培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好。菌體桿狀,1.0*1.5~2.0um,無芽孢,有莢膜。 具有自生固氮能力。
木糖氧化無色桿菌 種屬:Achromobacter xylosoxidans 描述 菌落圓形,凸起,乳白色,不透明,表面光滑,邊緣整齊規(guī)則。 耐受100 μg/ml Cd。
摩加夫芽孢桿菌 種屬:Bacillus mojavensis 描述 細(xì)胞桿狀、具圓端、成對(duì)或鏈狀排列、運(yùn)動(dòng)、周生鞭毛、中生芽孢、卵圓形、孢囊略膨大;革蘭氏陽性;幼齡培養(yǎng)物菌落酪黃色、后呈乳白色、邊緣圓整略透明、表面光滑且有光澤、微凸起
伯克霍爾德氏菌 種屬:Burkholderia sp. 描述 菌落白色,不透明,圓形凸起,有光澤,表面光滑濕潤(rùn),邊緣整齊。
檸檬節(jié)桿菌 種屬:Arthrobacter citreus 描述 在10℃~40℃范圍內(nèi)均能生長(zhǎng),適生長(zhǎng)溫度30℃-40℃;球形、無芽孢;菌落呈乳白色,不透明,邊緣圓整,表面光滑、濕潤(rùn),略隆起
密執(zhí)安棍狀桿菌 種屬:Clavibacter michiganensis 描述 菌體細(xì)長(zhǎng)桿狀、無芽孢、具圓端,成柵狀或V形排列;革蘭氏陽性;菌落呈黃色、不透明、邊緣圓整、表面光滑、隆起
平凡假單胞菌 種屬:Pseudomonas trivialis 描述 細(xì)胞桿狀、微彎;具圓端,成堆或成V形排列;菌落呈乳白色,不透明,邊緣不圓整,表面光滑,微隆起
棉花內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)sad1基因探針法PCR試劑盒子宮珠蛋白抗體,*,請(qǐng)?jiān)儍r(jià)
子宮內(nèi)膜抗體,*,請(qǐng)?jiān)儍r(jià)
己糖激酶3抗體,*,請(qǐng)?jiān)儍r(jià)
己糖激酶2抗體,*,請(qǐng)?jiān)儍r(jià)
己糖激酶1抗體,*,請(qǐng)?jiān)儍r(jià)
己糖6磷酸脫酶抗體,*,請(qǐng)?jiān)儍r(jià)
Anti-KChIP3 KChIP3 抗體(0.2 ml)
Anti-KChIP1 KChIP1抗體(50 ul)
Anti-KChIP1 KChIP1抗體(0.2 ml)
Anti-KCC1 KCC1抗體(50 ul)
Anti-KCC1 KCC1抗體(25 ul)
Anti-KCC1 KCC1抗體(0.2 ml)
Anti-KCa4.2 (Slick) KCa4.2 (Slick)抗體(50 ul)
?技術(shù)原理:
DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。
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