型 號
產(chǎn)品時間2024-11-25
所屬分類細(xì)胞器提取和染色
報價3200
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | DiD (DiIC18(5)) | 英文名稱 | DiD |
規(guī)格 | 10mg | 貨號 | EY-01X8571 |
運輸條件 | 藍(lán)冰運輸 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
背景:
DiD染料是一族親脂性的熒光染料,可以用來染細(xì)胞膜和其它脂溶性生物結(jié)構(gòu)。當(dāng)與細(xì)胞膜結(jié)合后其熒光強度大大增強,這類染料有很高的淬滅常數(shù)和激發(fā)態(tài)壽命。一旦對細(xì)胞染色,染料在整個細(xì)胞膜上擴(kuò)散,佳濃度時可以使整個細(xì)胞膜染色。
標(biāo)記:
1.將細(xì)胞培養(yǎng)基與EdU溶液按照500:1的比例混合,制成2×EdU標(biāo)記培養(yǎng)基。
2.提前將2×EdU標(biāo)記培養(yǎng)基預(yù)熱,然后將150微升2×EdU標(biāo)記培養(yǎng)基與等體積細(xì)胞培養(yǎng)基混合,獲得1×EdU溶液。
【注】:①不建議替換全部培養(yǎng)基,這樣可能會影響細(xì)胞增殖的速度。②配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配,用量以沒過細(xì)胞為宜。
3.孵育細(xì)胞2 h,棄培養(yǎng)基。
【注】:①培養(yǎng)時間取決于細(xì)胞的增殖速度和生長狀態(tài)。②大多數(shù)腫瘤細(xì)胞以及粘附細(xì)胞系均可采用2 h的孵育時間。
4.以1xPBS清洗細(xì)胞兩次,每次5 min, 以除去未摻入DNA的EdU殘留。
【注】:對于貼壁不牢的細(xì)胞可降低清洗強度。
實驗步驟:
1. 將細(xì)胞以 104-105 個細(xì)胞/孔的密度接種在 96 孔板 中,加入 100μL 培養(yǎng)基,含或不含待測化合物。在 CO2 培養(yǎng)箱中在 37℃ 下培養(yǎng)細(xì)胞 24 小時。
2. 向板中加入 10μL 不同濃度的待測物質(zhì)。
3. 在培養(yǎng)箱中將培養(yǎng)板培養(yǎng)適當(dāng)時間(如 6、12、24 或 48 小時)。
4. 向板的每個孔中加入 10μL CCK-8 溶液。小心不要將氣泡引入孔中。
5. 將平板在培養(yǎng)箱中孵育 1-4 小時。
6. 在讀板之前,在定軌振蕩器上輕輕混勻。
7. 使用酶標(biāo)儀測量 450nm 處的吸光度。
公司正在出售的產(chǎn)品:
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