商品屬性：

背景：

IFN-γ，也稱為IFNG，屬于I I型干擾素家族的一種分泌的蛋白質(zhì)。 IFN-γ主要由自然殺傷性T細胞（NK）產(chǎn)生。NK細胞作為天然免疫應答的組成部分，一旦抗原特異性免疫產(chǎn)生，CD4和CD8細胞毒性T淋巴細胞效應就會產(chǎn)生。 IFN-γ具有抗病毒，免疫調(diào)節(jié)和抗腫瘤特性。 IFNG除具有抗病毒活性:外，還具有重要的免疫調(diào)節(jié)功能，它是巨噬細胞的有效活化因子，對轉(zhuǎn)移的腫瘤細胞具有抗增殖作用，并且可以增強I型干擾素的抗病毒和抗腫瘤作用。IFN-γ單體包含一個有六個α螺旋的核心和一個在C端區(qū)域延伸的未折疊序列:組成。 IFN-γ對于抵抗病毒和細胞內(nèi)細菌感染的先天性和獲得性免疫應答以及控制腫瘤至關重要。 IFN-γ的異常表達與許多自身炎癥和自身免疫疾病有關。 IFN-γ在免疫系統(tǒng)中的重要性部分源于其直接抑制病毒復制的能力，重要的是源于其免疫刺激和免疫調(diào)節(jié)作用。

標記：

1.將細胞培養(yǎng)基與EdU溶液按照500：1的比例混合，制成2×EdU標記培養(yǎng)基。

2.提前將2×EdU標記培養(yǎng)基預熱，然后將150微升2×EdU標記培養(yǎng)基與等體積細胞培養(yǎng)基混合，獲得1×EdU溶液。

【注】：①不建議替換全部培養(yǎng)基，這樣可能會影響細胞增殖的速度。②配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配，用量以沒過細胞為宜。

3.孵育細胞2 h，棄培養(yǎng)基。

【注】：①培養(yǎng)時間取決于細胞的增殖速度和生長狀態(tài)。②大多數(shù)腫瘤細胞以及粘附細胞系均可采用2 h的孵育時間。

4.以1xPBS清洗細胞兩次，每次5 min, 以除去未摻入DNA的EdU殘留。

【注】：對于貼壁不牢的細胞可降低清洗強度。

實驗步驟：

1. 將細胞以 104-105 個細胞/孔的密度接種在 96 孔板 中，加入 100μL 培養(yǎng)基，含或不含待測化合物。在 CO2 培養(yǎng)箱中在 37℃ 下培養(yǎng)細胞 24 小時。

2. 向板中加入 10μL 不同濃度的待測物質(zhì)。

3. 在培養(yǎng)箱中將培養(yǎng)板培養(yǎng)適當時間（如 6、12、24 或 48 小時）。

4. 向板的每個孔中加入 10μL CCK-8 溶液。小心不要將氣泡引入孔中。

5. 將平板在培養(yǎng)箱中孵育 1-4 小時。

6. 在讀板之前，在定軌振蕩器上輕輕混勻。

7. 使用酶標儀測量 450nm 處的吸光度。

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