注意事項(xiàng):
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。產(chǎn)品僅用于科研操作過(guò)程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開(kāi),并且要充分混勻。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:兔粘液瘤病毒PCR檢測(cè)試劑盒多少錢
英文名稱:Rabbit Myxomatosis Virus(RMV)PCR
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
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PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,產(chǎn)品僅用于科研按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
產(chǎn)品僅用于科研典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán),通過(guò)多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其主要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長(zhǎng)短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開(kāi)始摻入,以目的基因?yàn)槟0鍙?’→3’方向延伸,合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
兔粘液瘤病毒PCR檢測(cè)試劑盒多少錢原理是由一對(duì)引物介導(dǎo),能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過(guò)n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
直鏈淀粉中文名稱: 直鏈淀粉其他名稱: 糖淀粉英文名稱: Amylose from potato產(chǎn)品規(guī)格: BR,土豆來(lái)源包裝:250毫克/1克/5克CAS號(hào):9005-82-7
馬鈴薯淀粉產(chǎn)品規(guī)格: BR包裝:500克CAS號(hào):9005-25-8分子式:(C6H10O5)n級(jí)別:BR干燥失重:≤15.0%
馬鈴薯浸出粉英文名稱: Potato extract產(chǎn)品規(guī)格: BR包裝:250克/1公斤分子式:(C6H10O5)n級(jí)別:BRPH:5~7
可溶性淀粉其他名稱: 淀粉糊精英文名稱: Starch soluble其他名稱: Amylodextrin產(chǎn)品規(guī)格: BR,冷水可溶包裝:500克產(chǎn)品規(guī)格: AR,冷水不溶
麥芽糊精英文名稱: Maltodextrin其他名稱: Dextrin from maize starch產(chǎn)品規(guī)格: BR包裝:500克CAS號(hào):9050-36-6級(jí)別:BR
糊精英文名稱: Dextrin產(chǎn)品規(guī)格: AR包裝:500克CAS號(hào):9004-53-9分子式:(C6H10O5)n級(jí)別:AR
α-環(huán)糊精中文名稱: α-環(huán)糊精英文名稱: α-Cyclodextrin其他名稱: Cyclohexapentylose;Cyclohexaamylose產(chǎn)品規(guī)格: 高純,98%包裝:5克/25克/100克/500克CAS號(hào):10016-20-3
β-環(huán)糊精英文名稱: β-Cyclodextrin其他名稱: beta-Shardinger dextrin;Cycloheptaamylose產(chǎn)品規(guī)格: 高純,99%包裝:250克CAS號(hào):7585-39-9C42H70O35=1134.98
兔粘液瘤病毒PCR檢測(cè)試劑盒多少錢1-Bromohexane 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)
Fludarabine phosphate 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)
tert-Butyl acrylate 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)
TERT-AMYLAMINE 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
Geneticin 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)
Sodium lignosulfonate 質(zhì)量規(guī)格:>70.0%(GC)
2,4,5-Trifluorobenzonitrile 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)
(-)-2-Amino-4-phenylbutyric acid 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
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