參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:雷氏普羅威登斯菌PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格
英文名稱:Providencia rettgeriPCR
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
?雷氏普羅威登斯菌PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格原理是由一對(duì)引物介導(dǎo),能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
產(chǎn)品僅用于科研特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán),通過多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其主要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長(zhǎng)短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因?yàn)槟0鍙?’→3’方向延伸,合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
3,5-二吡啶其他名稱: 3,5-二嘧啶英文名稱: 3,5-Difluoropyridine產(chǎn)品規(guī)格: BR,98%包 裝: 1克/5克CAS號(hào):71902-33-5C5H3F2N=115.08
吲哚乙酯其他名稱: 鹽吲哚酚;3-吲哚酚乙酯;β-乙氫氮茚;乙羥基吲哚;乙氧化吲哚;乙吲哚酚酯英文名稱: Indoxyl acetate其他名稱: 3-Acetoxyindole產(chǎn)品規(guī)格: BR,97%包 裝: 1克/5克CAS號(hào):608-08-2
4-甲氧基水楊100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,中文名稱: 4-甲氧基水楊其他名稱: 2-羥基-4-甲氧基甲英文名稱: 4-Methoxysalicylaldehyde其他名稱: 2-Hydroxy-4-methoxybenzaldehyde產(chǎn)品規(guī)格: AR,98%
咖啡中文名稱: 咖啡其他名稱: 3-(3,4-二羥基)-2-丙烯;3,4-二羥基丙烯;β-(3,4-二羥基)丙烯;3,4-二羥基肉桂;3-(3,4-二羥基基)丙烯;水解咖啡鞣英文名稱: Caffeic acid其他名稱: 3,4-Dihydroxycinnamic acid產(chǎn)品規(guī)格: AR,98%包 裝: 25克/100克/500克
氨基甲甲酯其他名稱: 氨基甲甲脂;甲基烏來坦;尿基;甲甲酯;甲烏來坦;氨基脲英文名稱: Urethylane其他名稱: Methyl carbamate產(chǎn)品規(guī)格: AR,98%包 裝: 100克/500克CAS號(hào):598-55-0
對(duì)羥基丙中文名稱: 對(duì)羥基丙其他名稱: 4’-羥基丙;對(duì)丙?;?;對(duì)甲氧乙英文名稱: 4′-Hydroxypropiophenone其他名稱: Paroxypropione產(chǎn)品規(guī)格: AR,98%包 裝: 25克/100克/500克
乙甲脒中文名稱: 乙甲脒其他名稱: 甲脒醋;甲脒乙酯;醋甲脒;甲脒乙鹽英文名稱: Formamidinium acetate其他名稱: Formamidine acetate salt產(chǎn)品規(guī)格: BR,99%包 裝: 25克/100克/500克
異香蘭中文名稱: 異香蘭其他名稱: 3-羥基-4-甲氧基甲;異香草;原兒茶-4-甲基醚;原兒茶-4-甲醚英文名稱: Isovanillic acid其他名稱: 3-Hydroxy-4-methoxybenzoic acid產(chǎn)品規(guī)格: BR,99%包 裝: 5克/25克/100克
雷氏普羅威登斯菌PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格Rutin 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(T)
Benzyl cinnamate 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)
Bromopyrogallol Red 質(zhì)量規(guī)格:>90.0%(GC)(T)
1,4,5,8-Tetrahydro-2,7-dimethoxynaphthalene 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)
Baccatine III 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)
5-Norbornene-2-carboxaldehyde 質(zhì)量規(guī)格:>96.0%(GC)
2-Piperidinoethylchloride hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
Troxerutin 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
注意事項(xiàng):
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
3.產(chǎn)品僅用于科研所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
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