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水溶性氯化物生化檢測試劑盒(滴定法)

型 號

產(chǎn)品時間2023-11-06

所屬分類信號系列

報價600

產(chǎn)品描述:水溶性氯化物生化檢測試劑盒(滴定法)氯是植物第16個必需營養(yǎng)元素。作為微量營養(yǎng)元素,其在植物體內(nèi)主要以離子形態(tài)參與光合作用 、抑制植物病害 、調(diào)節(jié)氣孔開閉、維護(hù)細(xì)胞滲透壓和保持體內(nèi)電荷平衡等生理活動。它的過量與不足均會導(dǎo)致植物生長不良。

產(chǎn)品概述

商品屬性:

產(chǎn)品名稱:水溶性氯化物生化檢測試劑盒(滴定法)

規(guī)格:50/48  

貨號 : EY-01S1362

測試方法:滴定法   

分類:信號系列

商品詳情:

測定意義

氯是植物第16個必需營養(yǎng)元素。作為微量營養(yǎng)元素,其在植物體內(nèi)主要以離子形態(tài)參與光合作用 、抑制植物病害 、調(diào)節(jié)氣孔開閉、維護(hù)細(xì)胞滲透壓和保持體內(nèi)電荷平衡等生理活動。它的過量與不足均會導(dǎo)致植物生長不良。

測定原理

在中性至弱堿性范圍內(nèi),以鉻酸鉀為指示劑,用滴定氯化物時,由于氯化銀的溶解度小于鉻酸銀的溶解度,氯離子首先被沉淀出來后,然后鉻酸鹽以鉻酸銀的形式被沉淀,產(chǎn)生磚紅色。

需自備的儀器和用品

天平、研缽、常溫離心機(jī)、移液器、蒸餾水。

 

粗酶液提?。?br/>

1、組織:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進(jìn)行冰浴勻漿。16000g,4℃離心20min,取上清置冰上待測。

2、細(xì)菌、真菌:按照細(xì)胞數(shù)量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);16000g, 4℃離心20min,取上清液置冰上待測。

3、血清等液體:直接測定。


5.png




ADH測定操作:

1. 分光光度計預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長到340 nm,蒸餾水調(diào)零。

2. 試劑三在25℃水浴中保溫30 min。

3. 在1mL石英比色皿中依次加入100μL樣本上清液、800μL試劑三和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A1和A2?!鰽測定管=A1-A2。

測定步驟:

1、分光光度計預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至340nm,蒸餾水調(diào)零。

2、將試劑二在37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)水浴10min以上。

3、操作表:

試劑名稱μL

測定孔

樣本

20

試劑二

760

試劑三

10

試劑四

10


將上述試劑按順序加入1 mL石英比色皿中,混勻后立即在340 nm波長下記錄初始吸光度A1和反應(yīng)1min后的吸光度A2,計算ΔA=A1-A2。

注意:若A1-A2大于0.5,需將樣本用提取液稀釋,使A1-A2小于0.5,可提高檢測靈敏度。計算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

NAD-MDH活力單位的計算:

1、血清(漿)NAD-MDH活力的計算

單位的定義:每毫升血清(漿)每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個酶活力單位。

NAD-MDH(nmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=6430×ΔA

2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中NAD-MDH活力的計算:

(1)按樣本蛋白濃度計算:

單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個酶活力單位。

NAD-MDH(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=6430×ΔA÷Cpr

(2)按樣本鮮重計算:

單位的定義:每g組織每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個酶活力單位。

NAD-MDH(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總)÷T =6430×ΔA÷W

(3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計算:

單位的定義:每1萬個細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個酶活力單位。

NAD-MDH(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(2000×V樣÷V樣總)÷T=3.215×ΔA

V反總:反應(yīng)體系總體積,8×10-4 L;ε:NADH摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.02mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應(yīng)時間,1 min;W:樣本質(zhì)量,g;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;2000:細(xì)胞或細(xì)菌總數(shù),2000萬。

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