注意事項(xiàng):
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。產(chǎn)品僅用于科研操作過(guò)程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開(kāi),并且要充分混勻。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:精氨酸支原體PCR檢測(cè)試劑盒在哪里有賣(mài)
英文名稱:Mycoplasma argininiPCR
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
?
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,產(chǎn)品僅用于科研按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
產(chǎn)品僅用于科研典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán),通過(guò)多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其主要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長(zhǎng)短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開(kāi)始摻入,以目的基因?yàn)槟0鍙?’→3’方向延伸,合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
精氨酸支原體PCR檢測(cè)試劑盒在哪里有賣(mài)原理是由一對(duì)引物介導(dǎo),能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過(guò)n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
鈀碳加氫催化劑其他名稱: 鈀碳鈣;林德拉催化劑英文名稱: Palladium on carbon hydrogenation其他名稱:產(chǎn)品規(guī)格: BR,5%包裝:25克產(chǎn)品規(guī)格: BR,10%
鈀粉英文名稱: Palladium產(chǎn)品規(guī)格: 4N包裝:1克CAS號(hào):7440-05-3Pd=106.42級(jí)別:4N
鉻霧抑制劑產(chǎn)品規(guī)格: F-53B包裝:1公斤CAS號(hào):83329-89-9分子式:C10ClF20KO4S級(jí)別:F-53B含量:≥98.0%
偶氮脒類(lèi)引發(fā)劑V30其他名稱: 偶氮異丁氰基甲酰;1-((氰基-1-甲基乙基)偶氮)甲酰英文名稱: CABN其他名稱: 1-((cya-methylethyl)azo)formamide;2-(1-Cya-methylethyl)azocarboxamide產(chǎn)品規(guī)格: BR包裝:25克/100克/500克CAS號(hào):10288-28-5
偶氮脒類(lèi)引發(fā)劑V40其他名稱: 偶氮二環(huán)己基甲腈;1,1'-偶氮雙(環(huán)己甲腈);1,1'-偶氮(氰基環(huán)己);1,1'-偶氮二環(huán)己腈;偶氮二環(huán)己腈;1,1’-偶氮二環(huán)己腈;1,1′-偶氮-二-(六氫芐腈);1,1'-氮雜雙(環(huán)己-1-腈);1,1'-偶氮(環(huán)己基-1-氰基);偶氮二(環(huán)己-1-腈)英文名稱: ACCN其他名稱: VAZO88;1,1'-Azobis(cyclohexanecarbonitrile);1,1'-Azodi(hexahydrobenzonitrile);1,1'-Azobis(cyclohexanecarbonitrile)產(chǎn)品規(guī)格: BR包裝:25克/100克CAS號(hào):2094-98-6
偶氮脒類(lèi)引發(fā)劑V50中文名稱: 偶氮脒類(lèi)引發(fā)劑V50其他名稱: 2,2-偶氮二(2-甲基丙基咪)二鹽鹽;2,2'-偶氮二異丁基脒二鹽鹽;偶氮二(2氨基丙脒)鹽鹽;偶氮二異丁脒鹽鹽;偶氮脒類(lèi)引發(fā)劑VAZO56;2,2’-偶氮二(2-甲基丙脒)二鹽鹽;2,2’-偶氮二(2-脒基丙)二鹽鹽;2,2’-偶氮二異丁脒氫化物;2,2'-氮雜雙(2-咪唑丙)二鹽鹽英文名稱: AAPH其他名稱: AIBA;2,2’-Azobis(2-methylpropionamidine) dihydrochloride;2,2'-Azobis(2-amidinopropane) dihydrochloride;2,2'-Azobis(isobutyramidine) dihydrochloride產(chǎn)品規(guī)格: 高純,98%包裝:25克/100克/500克
偶氮脒類(lèi)引發(fā)劑V59其他名稱: 偶氮二異戊腈;2,2'-偶氮雙二異戊腈英文名稱: AMBN其他名稱: VAZO67;2,2′-Azobis(2-methylbutyronitrile);2,2'-Azobis[2-methylbutanenitrile]產(chǎn)品規(guī)格: 高純,98%包裝:25克/100克/500克CAS號(hào):13472-08-7
偶氮脒類(lèi)引發(fā)劑V65其他名稱: 偶氮二異庚腈;2,2'-偶氮二異庚腈;2,2'-偶氮雙(2,4-二甲基戊腈);2,2’-偶氮-二-(2,4-二甲基戊腈);偶氮二甲基戊腈;2,2'-氮雜雙異庚腈英文名稱: ABVN其他名稱: VAZO52;2,2'-azobisisoheptonitrile;2,2'-Azobis(2,4-dimethyl)valeronitrile產(chǎn)品規(guī)格: 高純,98%包裝:25克/500克CAS號(hào):4419-11-8
精氨酸支原體PCR檢測(cè)試劑盒在哪里有賣(mài)1-Acetyl-2-phenylhydrazine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
1H-Imidazole-4-carbonitrile 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
BETA-D-GLUCOPYRANOSIDURONIC ACID 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
S-Phenyl-L-cysteine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
2-Butoxyethanol 質(zhì)量規(guī)格:>98%,多種CDK抑制劑
H-HIS(TRT)-2-CLTRT RESIN 質(zhì)量規(guī)格:>98%,不可逆EGFR抑制劑
Ethephon 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Naringenin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
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