運(yùn)輸及保存:
產(chǎn)品僅用于科研低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據(jù)機(jī)型決定,具體見(jiàn)使用方法)。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 堪薩斯分枝桿菌PCR檢測(cè)試劑盒哪家代理 |
英文名稱(chēng) | Mycobacterium kansasiiPCR |
分類(lèi) | PCR檢測(cè)試劑盒 |
技術(shù)特點(diǎn):
1堪薩斯分枝桿菌PCR檢測(cè)試劑盒哪家代理準(zhǔn)確可靠,臨床雙盲對(duì)照試驗(yàn)>1000例,結(jié)果與金標(biāo)準(zhǔn)測(cè)序法比對(duì),結(jié)果*性大于99%。
2高靈敏:可檢測(cè)低至10ng的人基因組DNA。
3快速:整個(gè)檢測(cè)流程只需3小時(shí)。
4產(chǎn)品僅用于科研簡(jiǎn)便:試劑盒提供預(yù)混好的試劑,使體系配置操作簡(jiǎn)便。
5防污染
6高特異性:雙重特異性組成,保證檢測(cè)結(jié)果的特異性和準(zhǔn)確性引物與DNA互補(bǔ)鏈結(jié)合必需*配對(duì),才能延伸。探針特異性與所檢測(cè)基因的PCR產(chǎn)物配對(duì),在延伸中產(chǎn)生熒光。
產(chǎn)品及特點(diǎn):
1. 即開(kāi)即用,用戶只需要提供伴放線放線桿菌樣品。
2. 根據(jù)伴放線放線桿菌保守序列設(shè)計(jì)的專(zhuān)一性引物,與相關(guān)病毒無(wú)交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量PCR檢測(cè),避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
使用方法:
一、稀釋PCR陽(yáng)性對(duì)照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取,多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽(yáng)性對(duì)照),一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照)??梢杂?0μL上步制備的PCR陽(yáng)性對(duì)照的第4號(hào)(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬(wàn)拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬(wàn)拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行)
10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,6個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照,并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加):
紫脲酸/紫尿酸/紫巴比土酸/5-異亞硝基巴比土酸/中草酸二酰脲-5-肟/5-(羥基亞氨基)巴比土酸/丙酮二酰脲-5-肟/5-亞硝基-2,4,6-三羥基嘧啶/四氧嘧啶-5-肟/Violuric acid monohydrate特純,97%10克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,26351-19-9RT,避光
氯鉑酸/氯化鉑/鉑氯氫酸/六氯合鉑(IV)酸/六氯合鉑酸/氯鉑酸六水合物/六氯鉑(Ⅳ)酸六水合物/六氯合鉑酸/二氫六氯化鉑/Hexachloroplatinic(Ⅳ) acid hexahydrateAR,37%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,18497-13-7RT,避光
氧化鐵/三氧化二鐵/紅色氧化鐵/氧化高鐵/205鐵紅/磁性氧化鐵紅/燒褐鐵礦/鐵丹/紅粉/威尼斯紅/Iron(III)oxideAR,99%500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,1309-37-1RT
硫酸鐵/硫酸高鐵/硫酸鐵(III)/Ferric sulfateAR,21-23%500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,15244-10-7或10028-22-5RT,避光
硫化亞鐵/硫化鐵/硫鐵/硫化鐵(Ⅱ)/一硫化鐵/Ferrous sulfideCP,70%500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,1317-37-9RT
氫氧化鐵/有水氧化鐵/三氫氧化鐵/Ferric hydroxideCP500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,1309-33-7RT
四氧化三鐵/磁性氧化鐵/黑色氧化鐵/磁鐵礦/氧化正亞鐵/精磁鐵砂/氧化鐵黑/Ferrosoferric oxideCP,98%500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,1317-61-9RT
鈦鐵試劑/鄰苯二酚-3,5-二磺酸鈉/鈦鐵試劑/試鈦靈/1,2-二羥基苯-3,5-二磺酸鈉/4,5-二羥基-1,3-苯二磺酸二鈉鹽/1,2-二羥基-3,5-苯二磺酸二鈉鹽/TironAR25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,149-45-1RT
硫化鉛/方鉛礦/硫化鉛晶體/硫酸鉛(II)/Lead(II)sulfideSP5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,1314-87-0RT
硬脂酸鉛/十八酸鉛/十八酸鉛鹽/硬酯酸鉛/二鹽基性硬脂酸鉛/雙(十八酸)二氧化二鉛/二鹽基硬脂酸鉛/Lead(II)stearateCP,26.2%250克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,56189-09-4RT
溴化鋰/二水合溴化鋰/Lithium bromide dihydrateCP,95%100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,85017-82-9RT
碳酸鋰/Lithium CarbonateAR,98%500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,554-13-2RT
偏硼酸鋰/Lithium metaborate octahydrateCP,99%100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,15293-74-0RT
磷酸鋰/Lithium phosphate hemihydrateCP,97%100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,10377-52-3RT
堪薩斯分枝桿菌PCR檢測(cè)試劑盒哪家代理Indole-3-carboxaldehyde 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
N,N-DIMETHYL-M-PHENYLENEDIAMINE DIHYDROCHLORIDE 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
2,4,6-Collidine 質(zhì)量規(guī)格:>98%
Chromium 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
NA 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
2-Iodoxybenzoic acid 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Tetraphenylphosphonium bromide 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
2-Methyl-5-nitroimidazole 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
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