注意事項:
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。產(chǎn)品僅用于科研操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:小鼠白血病病毒PCR檢測試劑盒價格
英文名稱:Mouse Leukemia Virus(MLV)RTPCR
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
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PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,產(chǎn)品僅用于科研按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR實驗步驟:
產(chǎn)品僅用于科研典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應組成一個循環(huán),通過多次循環(huán)反應,使目的DNA得以迅速擴增。其主要步驟是:
將待擴增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個寡核苷酸引物在其合適的復性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補結(jié)合,兩個引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴增片段的長短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因為模板從5’→3’方向延伸,合成DNA的新互補鏈。
小鼠白血病病毒PCR檢測試劑盒價格原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
癸二酸二甲酯/皮脂酸二甲酯/泌脂酸二甲酯/Dimethyl sebacateCP,97%100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,106-79-6RT
鄰苯二甲酸二壬酯/鄰苯二甲酸壬酯/鄰酞酸二壬酯/1,2-苯二甲酸二壬酯/增塑劑DNP/DNPAR,96%25毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,84-76-4RT
鄰苯二甲酸二正辛酯/苯二甲酸二辛酯/鄰酞酸二正辛酯/增塑劑DOP/鄰苯二酸二辛酯/鄰苯二甲酸二辛酯/DOPAR,99%500毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,117-84-0RT
癸二酸二正辛酯/皮脂酸二正辛酯/硬脂酸異辛酯/癸二酸二異辛酯/十八酸異辛酯/Di-n-octyl sebacateCP,99%500毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,27214-90-0RT
乙酰乙酸乙酯/丁酮酸乙酯/3-氧代丁酸乙基酯/乙酰醋酸乙脂ACE/乙基乙酰乙酸/EAACP500毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,141-97-9RT
正庚酸乙酯/庚酸乙酯/水芹酸乙酯/科涅克油/葡萄子油/Ethyl heptanoateCP,98%500毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,106-30-9RT
月桂酸乙酯/十二酸乙酯/十二烷酸乙酯/Ethyl laurateCP,98.5%250毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,106-33-2RT
正辛酸乙酯/辛酸乙酯/羊脂酸乙酯/亞羊脂酸乙酯/Ethyl octanoateCP,98%500毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,106-32-1RT
油酸乙酯/十八烯酸乙酯/(Z)-9-十八烯酸乙酯/9-十八烯酸乙酯/油酸乙基酯/順-9-十八烯酸乙酯/Ethyl oleateLR,98%100毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,111-62-6RT,避光
硬脂酸乙酯/十八酸乙酯/硬酯酸乙酯/十八碳酸乙酯/Ethyl stearateCP50克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,111-61-5RT
對甲苯磺酸乙酯/4-甲苯磺酸乙酯/乙基-4-甲基苯磺酸酯/4-甲基苯磺酸乙酯/對甲苯磺酰乙酯/Ethyl p-toluene sulfonateCP,98%100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,80-40-0RT
三乙酸甘油酯/甘油三乙酸酯/三醋酯/三醋酸甘油酯/丙三醇三乙酸酯/醋酸甘油酯/三醋精/1,2,3-丙三醇三乙酸酯/甘油三醋酸酯/甘油三乙醇酯/Glyceryl triacetateAR,98.5%500毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,102-76-1RT
油酸甘油酯/甘油單油酸酯/9-十八烯酸(Z)-2,3-二羥基丙酯/單油酸甘油酯/甘油單油酸酯/一油酸甘油酯/甘油油酸酯/MonooleinAR,40%100毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,111-03-5RT
三油酸甘油酯/甘油三油酸醋/(Z)-9-十八烯酸-1,2,3-丙三基酯/三油精/三苯基氯化四唑/油酸三甘酯/丙三醇三甘油酸酯/油精/甘油三油酸酯/Glycerol trioleateCP,98%100毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,122-32-7RT
小鼠白血病病毒PCR檢測試劑盒價格Ethylcyclohexane 質(zhì)量規(guī)格:TLC≥97%,標準品
Origanum oil 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR
NA 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
mulberroside A 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
H-D-GLU(OME)-OH 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
Isoprene 質(zhì)量規(guī)格:GC≥97%,標準品
ISOBUTYLLITHIUM 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標準品
LY 294002 HYDROCHLORIDE 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
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