運(yùn)輸及保存:
產(chǎn)品僅用于科研低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據(jù)機(jī)型決定,具體見(jiàn)使用方法)。
產(chǎn)品名稱 | 莫巴拉病毒PCR檢測(cè)試劑盒多少錢 |
英文名稱 | Mobala Virus(MOBV)RTPCR |
分類 | PCR檢測(cè)試劑盒 |
技術(shù)特點(diǎn):
1莫巴拉病毒PCR檢測(cè)試劑盒多少錢準(zhǔn)確可靠,臨床雙盲對(duì)照試驗(yàn)>1000例,結(jié)果與金標(biāo)準(zhǔn)測(cè)序法比對(duì),結(jié)果*性大于99%。
2高靈敏:可檢測(cè)低至10ng的人基因組DNA。
3快速:整個(gè)檢測(cè)流程只需3小時(shí)。
4產(chǎn)品僅用于科研簡(jiǎn)便:試劑盒提供預(yù)混好的試劑,使體系配置操作簡(jiǎn)便。
5防污染
6高特異性:雙重特異性組成,保證檢測(cè)結(jié)果的特異性和準(zhǔn)確性引物與DNA互補(bǔ)鏈結(jié)合必需*配對(duì),才能延伸。探針特異性與所檢測(cè)基因的PCR產(chǎn)物配對(duì),在延伸中產(chǎn)生熒光。
產(chǎn)品及特點(diǎn):
1. 即開(kāi)即用,用戶只需要提供伴放線放線桿菌樣品。
2. 根據(jù)伴放線放線桿菌保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物,與相關(guān)病毒無(wú)交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量PCR檢測(cè),避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
使用方法:
一、稀釋PCR陽(yáng)性對(duì)照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取,多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽(yáng)性對(duì)照),一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照)??梢杂?0μL上步制備的PCR陽(yáng)性對(duì)照的第4號(hào)(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬(wàn)拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬(wàn)拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行)
10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,6個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照,并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加):
L(-)酒石酸鈉/酒石酸鈉/L-酒石酸鈉/L-(+)-Tartaric acid disodium saltAR,99%500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,6106-24-7RT
偏釩酸鈉/二水偏釩酸鈉/釩酸鈉/Sodium metavanadate dihydrateAR,99.9%25克國(guó)產(chǎn)16519-65-6RT
無(wú)水偏釩酸鈉/釩酸鈉/Sodium metavanadateAR,99%25克國(guó)產(chǎn)13718-26-8RT
四苯硼鈉/四苯基硼酸鈉/四苯硼酸鈉/四苯基硼化鈉/NaTBPAR;99%10克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,143-66-8RT
草酸鈉/乙二酸鈉/草酸二鈉鹽/Sodium oxalateAR,99.8%500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,62-76-0RT
鋁酸鈉/偏鋁酸鈉/氧化鋁鈉/Sodium aluminateCP,41%500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,11138-49-1RT
銻酸鈉/偏銻酸鈉/Sodium antimonate高純,98%50克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,15432-85-6RT
鉍酸鈉/二水鉍酸鈉/偏鉍酸鈉/碲化鈉/Sodium bismuthateAR,90%250克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,12232-99-4RT,避光
硫酸氫鈉/酸式硫酸鈉/一水合硫酸氫鈉/重硫酸鈉/Sodium bisulfate monohydrateAR,98.5%500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,10034-88-5RT
結(jié)晶碳酸鈉/冰堿/結(jié)晶疏打/十水碳酸鈉/洗滌堿/石堿/Sodium carbonate decahydrateAR,99%500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,CAS:6132-02-1RT,避光
氟鋁酸鈉/冰晶石/氟鋁化鈉/六氟鋁酸鈉/氟化鋁鈉/鋁氟酸鈉/(OC-6-11)-六氟合鋁酸(3-)鈉/透長(zhǎng)石/玻璃長(zhǎng)石/Sodium fluoroaluminateCP,98%500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,13775-53-6或15096-52-3RT
氟硼酸鈉/四氟硼鈉/四氟硼酸鈉/氟硼化鈉/4-氟硼酸鈉/Sodium fluoroborateCP,98%500克國(guó)產(chǎn)13755-29-8RT
六偏磷酸鈉/偏磷酸六鈉/格來(lái)漢氏鹽/卡甘/磷酸鈉玻璃/格臘哈姆鹽/六偏/六聚偏磷酸鈉/Sodium hexametaphoshpateCP,95%500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,10124-56-8RT
多聚磷酸鈉/多聚偏磷酸鈉/六偏磷酸鈉/聚磷酸鈉鹽/聚偏磷酸鈉/Sodium polyphosphateCP,95%500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,68915-31-1RT
莫巴拉病毒PCR檢測(cè)試劑盒多少錢N,N'-Di-Boc-L-lysine hydroxysuccinimide ester 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
4-FLUOROPHENYL ISOTHIOCYANATE 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
(S)-(+)-2,2-Dimethylcyclopropanecarboxamide 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Chuanxiong rhizoMe oil 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
D(+)-Glucose 質(zhì)量規(guī)格:≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品
Benzoyl cyanide 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
DIPHENYL DISULFIDE 質(zhì)量規(guī)格:≥97%,BR
HAFNIUM(IV) 2,4-PENTANEDIONATE 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
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