技術(shù)特點(diǎn):
1悉尼馬爾太蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒哪家代理準(zhǔn)確可靠,臨床雙盲對(duì)照試驗(yàn)>1000例,結(jié)果與金標(biāo)準(zhǔn)測(cè)序法比對(duì),結(jié)果*性大于99%。
2高靈敏:可檢測(cè)低至10ng的人基因組DNA。
3快速:整個(gè)檢測(cè)流程只需3小時(shí)。
4簡(jiǎn)便:試劑盒提供預(yù)混好的試劑,使體系配置操作簡(jiǎn)便。
5防污染
6產(chǎn)品僅用于科研高特異性:雙重特異性組成,保證檢測(cè)結(jié)果的特異性和準(zhǔn)確性引物與DNA互補(bǔ)鏈結(jié)合必需*配對(duì),才能延伸。探針特異性與所檢測(cè)基因的PCR產(chǎn)物配對(duì),在延伸中產(chǎn)生熒光。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 悉尼馬爾太蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒哪家代理 |
英文名稱(chēng) | Marteilia sydneyiPCR |
分類(lèi) | PCR檢測(cè)試劑盒 |
產(chǎn)品及特點(diǎn):
1. 即開(kāi)即用,用戶(hù)只需要提供伴放線放線桿菌樣品。
2. 根據(jù)伴放線放線桿菌保守序列設(shè)計(jì)的專(zhuān)一性引物,與相關(guān)病毒無(wú)交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量PCR檢測(cè),避免后續(xù)污染。
5. 產(chǎn)品僅用于科研本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
運(yùn)輸及保存:
低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據(jù)機(jī)型決定,具體見(jiàn)使用方法)。
使用方法:
一、稀釋PCR陽(yáng)性對(duì)照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取,多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽(yáng)性對(duì)照),一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照)??梢杂?0μL上步制備的PCR陽(yáng)性對(duì)照的第4號(hào)(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬(wàn)拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬(wàn)拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行)
10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,6個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照,并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加):
四鹽酸精胺/四氫氯精胺/N,N’-二(3-氨丙基)-1,4-丁二胺四鹽酸鹽/精胺四鹽酸鹽/二氨基丙基四亞甲基二胺/N,N'-二(3-胺丙基)-1,4-丁二胺四鹽酸鹽/Spermine tetrahydrochloride分子生物級(jí),99%1克進(jìn)分306-67-2RT
亞精胺/精脒/N-(3-氨基丙基)-1,4-丁二胺/α-(γ-氨基丙氨)-δ-氨基丁烷/1,8-二氨基-4-氮辛烷/N-(3-氨基丙基)-1,4-丁二胺/精咪/精三胺/SpermidineBR,99%1克Fluka85561124-20-92~8℃
三鹽酸亞精胺/N-(3-氨丙基)-1,4-丁二胺三鹽酸鹽/亞精胺鹽酸鹽/Spermidine trihydrochloride生物技術(shù)級(jí),98%1克進(jìn)分334-50-9保存:-20℃
碘化[1-環(huán)己基-3-(3-*氨丙基)碳二亞胺]/水溶性碳二亞胺/CDCBR,98%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,132465-11-32~8℃,避光
N-羥基-5-降冰片烯-2,3-二甲酰亞胺/N-羥基-5-降冰片稀-2,3-二酰亞胺/N-羥基5-降冰片烯-2,3-二羥基亞胺/N-羥基-5-降冰片烯-2,3-酰亞胺/N-羥基-5-降冰片烯-2,3-二羧酸酰亞胺/HONBBR,98%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,21715-90-2RT
N-溴代丁二酰亞胺/N-溴代琥珀酰亞胺/溴丁二酰亞胺/NBSAR,99%100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,128-08-5RT
N,N,N,N-四甲基乙二胺/四甲替乙二胺/四甲基乙撐二胺/N,N,N’,N’-四甲基-1,2-乙二胺/1,2-雙(二甲氨基)/1,2-雙(二甲基氨基)乙烷/四甲基-1,2-亞乙基二胺/TEMED/TMEDABR,98%100毫升國(guó)產(chǎn)110-18-9RT,避光
N,N,N,N-四甲基對(duì)苯二胺二鹽/二鹽酸-4-氨基-N,N-二乙基苯胺/二鹽酸N,N,N',N'-四甲基-1,4-苯二胺/TMPDBR,98%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,637-01-4RT,避光
氯胺T/氯亞明T/氯氨基甲苯砜鈉/對(duì)甲苯磺酰氯胺鈉/N-氯-4-甲苯磺酰胺鈉鹽/Chloramine T trihydrateAR,99%500克國(guó)產(chǎn)7080-50-4RT,避光
1-乙基-3-(3-二甲氨丙基)碳二亞胺鹽酸鹽/1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽/1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽/1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽/1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺鹽酸鹽/EDC•HC1/EDAC•HC1特純,99%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,25952-53-82~8℃
酚酞單磷酸環(huán)己胺鹽/酚酞單磷酸二環(huán)己胺鹽/酚酞磷酸雙環(huán)己烷銨鹽/Phenolphthalein monophosphate bis(cyclohexylammonium) saltBR,90%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,14815-59-9保存:-20℃
鹽酸萘乙二胺/-1-萘乙二胺/ N-(1-Naphthyl)ethylenediamineAR,98%10克國(guó)產(chǎn)1465-25-4RT,避光
苯甲酰胺/苯酰胺/BenzamideCP25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,55-21-0RT
聚乙烯亞胺/聚乙醇胺/氮丙啶均聚物/聚乙烯亞氨/PEI50%,粉末100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,9002-98-6RT
悉尼馬爾太蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒哪家代理N-Carbobenzyloxy-L-aspartic acid 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
4-VINYLPHENYLBORONIC ACID 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,BR
1,1,2,2-TETRACHLORO-1,2-DIMETHYLDISILANE 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Solvent Red 127 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
Leonurine hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:UV≥98%,HPLC≥95%
Mordant Blue 13 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
NA 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
LITHIUM DEUTEROXIDE 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
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