產(chǎn)品及特點(diǎn):
1. 產(chǎn)品僅用于科研即開(kāi)即用,用戶(hù)只需要提供伴放線(xiàn)放線(xiàn)桿菌樣品。
2. 根據(jù)伴放線(xiàn)放線(xiàn)桿菌保守序列設(shè)計(jì)的專(zhuān)一性引物,與相關(guān)病毒無(wú)交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量PCR檢測(cè),避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 折光馬爾太蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒多少錢(qián) |
英文名稱(chēng) | Marteilia refringensPCR |
分類(lèi) | PCR檢測(cè)試劑盒 |
運(yùn)輸及保存:
折光馬爾太蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒多少錢(qián)低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據(jù)機(jī)型決定,具體見(jiàn)使用方法)。
使用方法:
一、稀釋PCR陽(yáng)性對(duì)照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,產(chǎn)品僅用于科研只提供可以直接使用的DNA片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取,多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽(yáng)性對(duì)照),一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照)。可以用10μL上步制備的PCR陽(yáng)性對(duì)照的第4號(hào)(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬(wàn)拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬(wàn)拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行)
10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,6個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
11. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照,并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加):
順丁烯二酸鈉/馬來(lái)酸鈉/(Z)-2-丁烯二酸單鈉鹽/失水蘋(píng)果酸氫鈉/順丁烯酸氫鈉/Maleic acid sodium saltBR,99%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,3105-55-3RT
乙二醇雙(2-氨基乙基)四乙酸/依他酸/EGTAAR,99%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,67-42-5RT
乙二醇雙(2-氨基乙基)四乙酸四鈉/3,6-二氧雜-1,8-辛二胺四乙酸四鈉/EGTA tetrasodiumAR,97%10克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,13368-13-3RT
乙二胺四乙酸/四乙酸二氨基乙烯/托立龍/四乙酸二氨基乙烯/維爾烯酸/乙底酸/依地酸/EDTAAR,99.5%250克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,60-00-4RT
乙二胺四乙酸鐵鈉鹽/EDTA鐵鈉/EDTA一鈉鐵/乙二胺四乙酸一鈉鐵/(OC-6-21)-[[N,N’-1,2-乙二基雙[N-(羧基甲基)氨基乙酸根]](4-)N,N’,O,O’,O,N,O,N’]鐵酸(1-)鈉/鐵依地酸鈉/乙二胺四乙酸鈉鐵(Ⅲ)鹽/EDTA-FeNaCP,98.0%100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,15708-41-5RT
乙二胺四乙酸二鈉鎂鹽四水物/EDTA二鈉鎂四水物/乙二胺四乙酸鎂二鈉鹽四水物/EDTA-MgNa2CP,98.5%100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,29932-54-5RT
乙二胺四乙酸二鈉鎂鹽/EDTA二鈉鎂/乙二胺四乙酸鎂二鈉鹽/EDTA-MgNa2CP,98.5%100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,14402-88-1RT
乙二胺四乙酸二鈉鹽/四乙酸二氨基乙烯二鈉鹽/托立龍B/氨羧絡(luò)合劑III/螯合劑III/絡(luò)合酮II/ EDTA二鈉/N,N’-1,2-乙二基雙(N-羧基甲基)氨基乙酸二鈉鹽二水合物/絡(luò)合劑EDTA二鈉/氨羧絡(luò)合亮劑Ⅲ/EDTA-2NaAR,99%250克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,6381-92-6RT
乙二胺四乙酸二鈉鈣鹽/乙二胺四乙酸鈣二鈉/EDTA二鈉鈣/依地酸鈣二鈉二水合物/依地酸鈉鈣/EDTA 鈣鈉鹽/EDTA-2NaCa特純,97%250克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,23411-34-9RT
乙二胺四乙酸二鈉錳鹽/乙二胺四乙酸錳二鈉/EDTA二鈉錳/EDTA錳二鈉/EDTA錳鈉鹽/Ethylenediaminetetraacetic acid manganese disodium salt hydrateAR,97%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,15375-84-5RT
乙二胺四乙酸二鈉鋅鹽/乙二胺四乙酸鋅二鈉/EDTA二鈉鋅/Disodium zinc ethylenediaminetetraacetate tetrahydrateAR,98%100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,176736-49-5RT
乙二胺四乙酸二鈉銅鹽/乙二胺四乙酸銅二鈉/EDTA二鈉銅/乙二胺基四乙酸銅二鈉鹽/Ethylenediaminetetraacetic acid copper(II) disodium salt超純,98%250克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,39208-15-6RT
乙二胺四乙酸四鈉鹽/EDTA四鈉鹽/EDTA tetrasodium saltAR,99%,帶4水100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,CAS:62-02-8RT
乙二胺四乙酸二鉀鹽/乙二胺四乙酸鉀/EDTA二鉀鹽二水合物/EDTA-2K超純,99%100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,25102-12-9RT
折光馬爾太蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒多少錢(qián)3-Chloropyridin-2-ol 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Linuron 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Acetylenedicarboxylic acid 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
4-PHENOXYBENZENESULFONYL CHLORIDE 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
LIPOPHILIC SEPHADEX 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
3-(Trifluoromethyl)phenylacetone 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
1,4-Diaminobutane dihydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:≥97%,BR
9-Anthracenemethanol 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
技術(shù)特點(diǎn):
1產(chǎn)品僅用于科研準(zhǔn)確可靠,臨床雙盲對(duì)照試驗(yàn)>1000例,結(jié)果與金標(biāo)準(zhǔn)測(cè)序法比對(duì),結(jié)果*性大于99%。
2高靈敏:可檢測(cè)低至10ng的人基因組DNA。
3快速:整個(gè)檢測(cè)流程只需3小時(shí)。
4簡(jiǎn)便:試劑盒提供預(yù)混好的試劑,使體系配置操作簡(jiǎn)便。
5防污染
6高特異性:雙重特異性組成,保證檢測(cè)結(jié)果的特異性和準(zhǔn)確性引物與DNA互補(bǔ)鏈結(jié)合必需*配對(duì),才能延伸。探針特異性與所檢測(cè)基因的PCR產(chǎn)物配對(duì),在延伸中產(chǎn)生熒光。
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