參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:馬杜拉分枝菌PCR檢測試劑盒多少錢
英文名稱:Madurella spp.PCR
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
馬杜拉分枝菌PCR檢測試劑盒多少錢原理是由一對引物介導(dǎo),能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
產(chǎn)品僅用于科研特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR實驗步驟:
典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個循環(huán),通過多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其主要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,兩個引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因為模板從5’→3’方向延伸,合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
三十烷醇/1-三十烷醇/蜂花醇/正三十烷醇/三十醇/1-羥基三十烷/蜂花烷醇/Triacontanol試劑級,92%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,593-50-0RT
馬來酰肼/青鮮素/1,2-二氫-3,6-噠嗪二酮/順丁烯二酰肼/抑芽丹/本息/失水蘋果酰肼/二羥基噠嗪/Maleic Hydrazide高純,99%250克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,123-33-1RT
馬來酰肼鉀鹽/青鮮素鉀鹽/Maleic hydrazide potassium salt高純,99%250克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,689-82-7RT
二苯基羰酰二肼/二苯氨基脲/二苯卡巴肼/二苯基碳酰二肼/1,5-二苯羰酰肼/均二苯卡巴肼/對稱二苯基羰二肼/二苯偕肼/羰代雙苯肼/二苯碳酰二肼/對稱二苯氨基脲/1,5-二苯基卡巴肼/DiphenylcartazideAR25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,140-22-7RT,避光
甜菜堿鹽酸鹽/鹽酸甜菜堿/甘氨酸三內(nèi)鹽鹽酸鹽/*銨乙內(nèi)酯鹽酸鹽/Betaine HC1超純,99%100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,590-46-5RT
無水甜菜堿/甜菜素/*銨乙內(nèi)酯/甘氨酸三內(nèi)鹽/*基甘氨酸/Betaine超純,99%100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,107-43-7RT,避光
腺苷/腺嘌呤核苷/9-β-D-呋喃核糖基腺嘌呤/腺素苷/胰苷/腺呤配糖/腺尿環(huán)核苷/腺甙/Adenosine高純,99%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,58-61-72~8℃,避光
5´-腺苷一磷酸/5´-腺苷酸/腺苷-5′-單磷酸/腺苷-5′-磷酸/5′-磷酸腺苷/5'-腺嘌呤核苷酸/5'-腺嘌呤核甙酸;5-單磷酸腺苷/5´-AMP高純,95%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,61-19-82~8℃
5-腺苷一磷酸二鈉鹽/腺苷-5′-單磷酸二鈉/5´-腺苷酸二鈉/5'-腺嘌呤核苷酸二鈉鹽/5'-腺嘌呤核甙酸二鈉鹽/5-磷酸腺苷二鈉鹽/單磷酸腺苷二鈉/一磷酸腺苷二鈉/5'-AMP,2Na超純,98%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,4578-31-82~8℃
A250/A260=0.79~0.89
A250/A260=0.74~0.82
胞嘧啶/4-氨基-2-羥基嘧啶/細(xì)胞堿/細(xì)胞嘧啶/氧胞嘧啶/胞嗪/4-氨基-2(1H)嘧啶酮/Cytosine超純,99%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,71-30-7RT
胞苷/胞嘧啶核苷/胞嘧啶核糖核苷/胞甙/4-氨基-1-β-D-呋喃核糖基-2-(1H)-嘧啶酮/Cytidine超純,99%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,65-46-3RT
5′- 胞苷單磷酸/5′- 胞苷酸/5'-單磷酸胞苷/5'-胞嘧啶核苷酸/5'-胞甙酸/5'-磷酸胞嘧啶核苷/胞苷-5’-單磷酸/胞苷-5′磷酸/胞苷-5'-一磷酸/5′- CMP高純,95%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,63-37-62~8℃
馬杜拉分枝菌PCR檢測試劑盒多少錢O-TOLUENESULFONYL CHLORIDE 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
Silicone SE-52 質(zhì)量規(guī)格:>99%,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
2-Bromo-6-methoxypyridine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
METHYL LINOLENATE 質(zhì)量規(guī)格:>98%,進(jìn)分
Decyl alcohol 質(zhì)量規(guī)格:>98%,進(jìn)分
4-Aminoantipyrine 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR
DI-N-HEXYL SULFIDE 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR
SILICONE OV-1 質(zhì)量規(guī)格:>97%
注意事項:
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.產(chǎn)品僅用于科研所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
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