傘枝梨頭霉PCR試劑盒具有快速簡(jiǎn)便、靈敏度高、特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性好等優(yōu)點(diǎn),可更大限度的減少人為誤差。使用時(shí)只需加入DNA模板和引物既可。使用方便快捷,能避免PCR操作過(guò)程中的污染,使用時(shí)只需取適量溶液,加入模板和引物,并加入去離子水補(bǔ)足體積,使溶液濃度為1×即可進(jìn)行反應(yīng)。使用前請(qǐng)保證充分溶解并混勻,操作需在冰上進(jìn)行。本產(chǎn)品就是為此目的根據(jù)PCR原理開(kāi)發(fā)的試劑盒。具有高靈敏度、高特異性、高穩(wěn)定性。
傘枝梨頭霉PCR試劑盒反應(yīng)的準(zhǔn)備:
待各組份融化后先瞬時(shí)離心,然后輕彈混勻。按已滅菌的PCR管中配制反應(yīng)體系,每次實(shí)驗(yàn)需加一個(gè)陰性和一個(gè)陽(yáng)性對(duì)照,測(cè)試反應(yīng)管可以有多個(gè)。配制過(guò)程中應(yīng)注意無(wú)菌,戴口罩,并注意避免操作產(chǎn)生的氣溶膠造成樣品間的交叉污染,推薦在有風(fēng)壓的設(shè)備如超凈臺(tái)或生物安全柜中進(jìn)行操作。建議配制完畢后瞬時(shí)離心以使液體沉至管底。
傘枝梨頭霉PCR試劑盒的使用方法:
注:所有試劑使用前需*解凍,混合均勻,離心數(shù)秒后使用。
1、樣本處理
待檢樣本的核酸提取可采用PCR試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等,具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說(shuō)明書(shū);陽(yáng)性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無(wú)需提取,可直接使用。
2、擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備
取N個(gè)(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽(yáng)性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMDRT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1μl(也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMDRT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。