NOD樣受體1elisa試劑盒的操作流程如下:
?。?)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
?。?)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,產(chǎn)品僅用于科研用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
?。?)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
?。?)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
?。?)洗板,同(4)。
?。?)每孔加1:稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液。
?。?)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
?。?)洗板,同(4)。
?。?0)分別測(cè)450nm吸光值W1和630nm吸光值W2,測(cè)得的OD值為兩者之差,以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
?。?1)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的OD值后,計(jì)算S/N值。
NOD樣受體1elisa試劑盒的使用注意事項(xiàng):
1、雖然本試劑在有效期過后很長(zhǎng)一段時(shí)間仍可以使用,但還是強(qiáng)烈建議您在管體規(guī)定的有效期內(nèi)正確使用。
2、請(qǐng)不要在臟亂和強(qiáng)光環(huán)境中取用,以免造成污染和失效。
3、如果一次使用很少可以將其適當(dāng)分裝后使用,這樣可以防止試劑污染。