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    產(chǎn)氣腸桿菌PCR試劑盒的使用操作說(shuō)明

    點(diǎn)擊次數(shù):750次  更新時(shí)間:2020-05-13
       產(chǎn)氣腸桿菌PCR試劑盒是簡(jiǎn)便的利用CTAB取大腸桿菌基因組DNA的試劑盒,其提取原理是利用蛋白酶K消化蛋白,CTAB沉淀多糖,再經(jīng)加熱使蛋白變性與DNA分離,乙醇沉淀核酸獲得基因組DNA,可進(jìn)行酶切、PCR等下游實(shí)驗(yàn)。該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域,不用于臨床診斷或治療。
     
      產(chǎn)氣腸桿菌PCR試劑盒的操作說(shuō)明:
      1、本品包含一份甘油菌,使用本甘油菌時(shí)可以不用*融解,在甘油菌表面蘸取少量涂板或進(jìn)行液體培養(yǎng)即可。也可以*融解后使用,但隨著凍融次數(shù)的增加,細(xì)菌的活力會(huì)逐漸下降。
     
      2、為保證菌種純正,避免其它細(xì)菌污染,盡量先劃平板,然后再挑單克隆菌落進(jìn)行后續(xù)操作。
      冷凍管開(kāi)封:
      用浸過(guò)75%酒精的脫脂棉嚴(yán)格消毒冷凍管蓋。
     
      菌株復(fù)溶:
      無(wú)菌環(huán)境中旋開(kāi)裝有復(fù)溶液的滴瓶蓋,吸取1ml左右復(fù)溶液,加入到冷凍管中。輕輕振蕩,使凍干菌株溶解呈懸浮狀。
     
      菌株復(fù)壯:
      用無(wú)菌吸管吸取菌懸液,轉(zhuǎn)移到復(fù)溶液滴瓶中。做好標(biāo)識(shí),在適宜溫度下培養(yǎng)。細(xì)菌在30-­‐35℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24-­‐48h,真菌在23-­‐28℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24-­‐72h(必要時(shí),可適當(dāng)延長(zhǎng)培養(yǎng)時(shí)間)。
     
      菌株傳代:
      將得到的菌株的新鮮培養(yǎng)物轉(zhuǎn)接到適宜的固體培養(yǎng)基及液體培養(yǎng)基中(盡量增大接種量:如用無(wú)菌吸管吸取≥50μl新鮮培養(yǎng)物至固體培養(yǎng)基,邊移動(dòng)邊緩慢釋放),適宜溫度下培養(yǎng),用以菌株的保藏、傳代及制備工作菌株。
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