黃曲霉PCR試劑盒采用間接競爭ELISA方法,在酶標(biāo)板微孔條上預(yù)包被黃曲霉毒素M1抗原,樣本中黃曲霉毒素M1和微孔條上抗原競爭黃曲霉毒素M1抗體,同時(shí)黃曲霉毒素M1抗體與酶標(biāo)二抗相結(jié)合,經(jīng)TMB底物顯色,樣本吸光值與其含有的黃曲霉毒素M1成負(fù)相關(guān),與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較再乘以其對應(yīng)的稀釋倍數(shù),即可得出樣品中黃曲霉毒素M1的含量。
黃曲霉PCR試劑盒的原理:
基于競爭性酶聯(lián)反應(yīng)原理,相關(guān)的抗體已經(jīng)包被于微孔板上。***分析時(shí),樣品加入微孔孵育,洗板后加入酶標(biāo)記物,若樣品殘留有黃曲霉M1就會競爭包被抗體,抑制HRP酶標(biāo)與包被抗體結(jié)合,加入TMB后顯色反應(yīng),顏色顯色強(qiáng)度與樣品中靶毒素的含量成反比。
黃曲霉PCR試劑盒的質(zhì)量要求:
1、真實(shí)性:重組蛋白產(chǎn)品一致經(jīng)過N末端氨基酸序列分析;必要時(shí)應(yīng)用SDS-PAGE,RP-HPLC和質(zhì)譜(MS)檢測其真實(shí)性。
2、純度:應(yīng)用SDS-PAGE和RP-HPLC方法分析產(chǎn)品純度。
3、生物活性:進(jìn)行相應(yīng)的體外(invitro)或體內(nèi)(invivo)活性檢測。
4、蛋白含量:通過紫外光譜分析,SDS-PAGE電泳檢測;必要時(shí)應(yīng)用HPLC定量標(biāo)準(zhǔn)蛋白溶液。
5、內(nèi)毒素:kineticLAL法檢測內(nèi)毒素。
6、微生物:重組蛋白在裝瓶之前都經(jīng)過濾除菌處理。