人蛋白elisa檢測試劑盒采取直接競爭法:酶標板上包被的抗原與加入的校準品(或樣本)中的抗原競爭結(jié)合加入的酶標抗體;洗去多余酶標抗體,用TMB底物顯色;樣本吸光值與其殘留物喹諾酮類呈負相關(guān),與校準曲線比較再乘以其對應(yīng)的稀釋倍數(shù),即可得出樣品中喹諾酮類的含量??啥ㄐ远繖z測動物組織、蜂蜜等樣本中喹諾酮類的殘留量。
試驗原理
本試劑盒采取直接競爭法:酶標板上包被的抗原與加入的校準品(或樣本)中的抗原競爭結(jié)合加入的酶標抗體;洗去多余酶標抗體,用TMB底物顯色;樣本吸光值與其殘留物喹諾酮類呈負相關(guān),與校準曲線比較再乘以其對應(yīng)的稀釋倍數(shù),即可得出樣品中喹諾酮類的含量。
人蛋白elisa檢測試劑盒的操作步驟:
1、取預包被的檢測板(根據(jù)樣品多少,可拆開分次使用),將稀釋好的待檢血清取100μl加入到檢測板孔中。陰性對照和陽性對照各設(shè)2孔,每孔100μl。輕輕振勻孔中樣品(勿溢出),置37℃溫育30分鐘。
2、甩掉板孔中的溶液,用洗滌液洗板5次,200μl/孔,每次靜置3分鐘倒掉,再在干凈吸水紙上拍干。
3、每孔加羊抗豬酶標二抗100μl,置37℃溫育30分鐘。
4、洗滌5次, 方法同2。切記每次在干凈吸水紙上拍干。
5、每孔先加底物液A一滴、再加底物液B一滴,混勻,室溫(18℃-25℃)避光顯色10分鐘。
6、每孔加終止液1滴(50μl),10分鐘內(nèi)測定結(jié)果(測定前在震蕩器上輕輕震動一下)。